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[发明专利]高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂-CN201510462708.3有效
发明人：李海燕;陈欢;李晓薇;李玉;王法微;李晰亮;刘秀明;姚娜;董园园;王南;王琦;王秀然;卢天成;王岩;孙喆;孙天旭 -专利权人：吉林农业大学
申请日： 2015-08-01 - 公布日： 2018-10-16 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，通过构建真菌特异性表达植酸酶phyA基因的安全表达载体pCB130NG‑phyA，并转入蛹虫草原生质体，再生获得转基因蛹虫草子实体后，以子实体为母种，培养制得转基因蛹虫草菌丝，PDA液体培养基培养，离心收集菌体，烘干粉碎制得高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，可直接添加于饲料中饲喂动物，不仅能增加动物对磷的利用率，能大大提高养殖动物各期平均日增重和料肉比，促进动物生长，增强动物免疫能力，而且具有无耐药性、改善动物产品品质等优点，而且使磷的排泄量降低了32.14‑56.14％，从而有利于增加养殖效益，降低对环境的污染，应用前景十分诱人。
表达植酸酶药用真菌菌丝饲料添加剂

[发明专利]一种猪蓝耳病重组疫苗-CN201510462709.8有效
发明人：李海燕;李晓薇;李玉;王法微;赵竟男;李校堃;王琦;刘秀明;姚娜;孙天旭;董园园;王南;王秀然;卢天成;王岩;孙喆 -专利权人：吉林农业大学
申请日： 2015-08-01 - 公布日： 2018-08-10 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗，将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联，构建了融合基因ORF3‑ORF5，插入真菌特异性双T‑DNA安全表达载体pCB130NG中，获得一种表达载体pCB130NG‑ORF3‑ORF5，利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体，经鉴定为阳性的菌丝体，培养获得T1代子实体，利用PCR筛选出只含目的基因而不含选择标记基因的子实体个体，培养至T2代，获得稳定表达猪蓝耳病病毒基因的转基因食药用真菌。通过转基因真菌菌丝的发酵培养，离心收集菌丝，烘干或冻干后，粉碎制备猪蓝耳病重组疫苗。利用本发明生产的猪蓝耳病疫苗各批次间质量差异小、产量大、成本低，且可以直接通过口服饲喂动物，具有广泛的社会效益和经济效益。
重组疫苗猪蓝耳病病毒食药用真菌菌丝表达载体蓝耳病子实体种猪农杆菌介导法选择标记基因猪蓝耳病疫苗电击法转化转基因真菌发酵培养离心收集目的基因融合基因饲喂动物稳定表达原生质体质量差异猪蓝耳病菌丝体转基因烘干真菌冻干构建制备串联基因安全生产

[发明专利]重组糖基化蛋白P39及其制备方法和应用-CN201810239679.8在审
发明人： 王秀然;刘思阳;付玉芹;王岩;卢天成;李思圆;孙喆;李海燕;胡祥坤;王茗宇;郑晗旭 -专利权人：吉林农业大学
申请日： 2018-03-22 - 公布日： 2018-07-24 - 主分类号： C07K14/23 文献下载
摘要：一种重组糖基化蛋白P39及其制备方法和应用，涉及重组蛋白领域。本发明包括：对p39基因进行克隆，将PCR片段与克隆载体pMD‑19T(Simple)相连，经测序和酶切验证正确后将目的片段与真核表达载体pPICZαA相连构建重组表达质粒pPICZαA‑P39；电转化法将质粒pPICZαA‑P39转化至毕赤酵母GS115感受态细胞，经诱导表达，亲和层析纯化，分子筛进一步分离纯化后经western blot验证即为目的蛋白，最佳发酵条件为：pH6、磷酸盐浓度0.02M、甲醇诱导浓度1％、诱导72h，纯化后的重组蛋白P39浓度为5mg/ml。本发明为布鲁氏菌流行性疾病免疫预防奠定基础。
质粒pPICZ α A 制备方法和应用重组糖基化重组蛋白蛋白验证分子筛亲和层析纯化真核表达载体重组表达质粒最佳发酵条件流行性疾病毕赤酵母布鲁氏菌电转化法分离纯化甲醇诱导克隆载体免疫预防目的蛋白目的片段诱导表达磷酸盐测序构建酶切诱导克隆转化

[发明专利]一种降低免疫原性的组合物及其制备方法和应用-CN201711369745.5在审
发明人： 王秀然;王晓龙;卢天成;王岩;许春晓;付玉芹;李思圆;孙喆;胡祥坤;刘思阳;王茗宇;李海燕;杨艳玲 -专利权人：吉林农业大学
申请日： 2017-12-19 - 公布日： 2018-06-01 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：一种降低免疫原性的组合物及其制备方法和应用，涉及蛋白质的免疫原性领域，本发明包括：将50mmol/L高碘酸钠与几丁寡糖以摩尔比为1:1的比例进行氧化反应；按EDC和NHS的摩尔比为1:1的比例向上述反应体系中加入EDC和NHS；按候选抗原蛋白与几丁寡糖的摩尔比为1:1000的投料比向上述反应体系中加入候选抗原蛋白，室温过夜反应，将最终反应体系补足至5ml，蛋白质的侧链氨基基团会替代酰胺键形成糖蛋白；加入透析袋，将透析袋置于50mmol/L、PH 9.0的碳酸盐缓冲液中；用PBS，4℃透析过夜，透析结束后收集袋内样品，获得几丁寡糖修饰的候选抗原蛋白。本发明可显著降低蛋候选抗原蛋白的免疫原性。
候选抗原几丁寡糖摩尔比蛋白制备方法和应用降低免疫原性免疫原性透析袋透析蛋白质侧链氨基基团碳酸盐缓冲液高碘酸钠氧化反应收集袋糖蛋白投料比酰胺键修饰替代

[发明专利]重组Wzt蛋白兔血清多克隆抗体及其制备方法-CN201710579816.8在审
发明人： 王秀然;王浩;卢天成;王岩;李海燕;付玉芹;孙喆;李思圆;贾宇;王茗宇;刘思阳;胡祥坤;边红;李全亮 -专利权人：吉林农业大学
申请日： 2017-07-17 - 公布日： 2017-10-10 - 主分类号： C07K16/12 文献下载
摘要：重组Wzt蛋白兔血清多克隆抗体及其制备方法，涉及抗体制备领域，填补了应用重组Wzt蛋白制备特异性多克隆抗体的空白。该多克隆抗体的制备方法包括将重组Wzt蛋白与等体积的弗氏完全佐剂混合乳化后，在雌性家兔背部进行皮下多点注射；二次免疫一周后，将重组Wzt蛋白与等体积的弗氏不完全佐剂混合乳化后，在雌性家兔背部进行皮下多点注射；按二次免疫过程每间隔一周进行三次、四次免疫；每次免疫后采集雌性家兔耳静脉血，检测兔血清抗体效价；第四次免疫一周后，收集兔全血，离心收集上清得兔血清，经纯化后得到重组Wzt蛋白兔血清多克隆抗体。该重组Wzt蛋白兔血清多克隆抗体特异性良好，可用于检测布鲁氏菌Wzt蛋白。
重组 wzt 蛋白血清克隆抗体及其制备方法

[实用新型]一种架空导线接续金具-CN201620196791.4有效
发明人：于会;陈有双;王秀然;张小杰;周杨 -专利权人：国网冀北电力有限公司迁西县供电分公司
申请日： 2016-03-15 - 公布日： 2016-07-13 - 主分类号： H01R11/14 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种架空导线接续金具，属于电气连接金具技术领域。技术方案是：上夹板（4）与下夹板（5）形状相同，两两一对，上夹板（4）与下夹板（5）的中部为圆弧形，上夹板（4）与下夹板（5）相互匹配，中部的圆弧形向外，导线一（1）与导线二（2）的端部搭接处设置在上夹板（4）与下夹板（5）之间；所述上夹板（4）与下夹板（5）的两个端部分别设有穿钉孔（9），穿钉（6）从上夹板（4）与下夹板（5）的穿钉孔中穿过，上夹板（4）与下夹板（5）的端部通过穿钉（6）、弹簧垫（7）和螺母（8）固定在一起。本实用新型的有益效果是：结构简单，便于操作，连接紧密，效果良好，节省了人力物力，降低了施工成本。
一种架空导线接续

[实用新型]一种配电变压器接地装置-CN201620070336.X有效
发明人：陈有双;董浩宇;王秀然;王铭汉;张鹤群 -专利权人：国网冀北电力有限公司唐山供电公司;国家电网公司
申请日： 2016-01-22 - 公布日： 2016-06-08 - 主分类号： H02B1/16 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种配电变压器接地装置，属于配电接地技术领域。技术方案是：接地引下线一（3）连接JP柜（11）和接地连接板一（2），电表箱（12）的外壳与接地连接板一（2）连接，接地连接板一（2）通过接地极一（1）接地；变压器（4）的中性点、变压器（4）的外壳和避雷器（5）的接地端分别连接接地连接板二（9），高压电缆（7）的外皮通过接地引下线二（10）连接接地连接板二（9），接地连接板二（9）通过接地极二（8）接地。本实用新型安装方便，易于操作，效果良好，即使工作人员在不停电的情况下抄表、检修配电箱设施，也不会意外触电，同时保证路人、孩子误碰地面箱体、护栏等电力设施时，不会发生触电的危险。
一种配电变压器接地装置

[实用新型]一种用于测量发电机定子定位筋弦距的工具-CN201420386750.2有效
发明人：彭贵军;王秀然;施代勇;赵七美;杨轩;杨仕莲;李伟;孙雪娟;李浩;陈浩;杨建文;达为 -专利权人：中国水利水电第十四工程局有限公司
申请日： 2014-07-14 - 公布日： 2014-11-12 - 主分类号： G01B5/14 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种用于测量发电机定子定位筋弦距的工具，旨在提供一种测量方便、快速、准确的用于测量发电机定子定位筋弦距的工具。它包括：一测量杆，所述测量杆的长度大于相邻定位筋间的弦距；一固定设置于测量杆一端用于卡接一侧定位筋端面夹角的卡槽板；一固定设置于测量杆上用于与另一侧定位筋端面接触的限位件；一用于测量的百分表；以及一固定设置于测量杆上且位于限位件和卡槽板之间用于固定支撑百分表的固定件；所述卡槽板及限位件分别与相邻的定位筋接触后，所述百分表的测头与限位件一侧的定位筋的端面夹角相接触。本实用新型可有效提高定位筋安装的精准度和质量，产生较好的社会效益和经济效益。
一种用于测量发电机定子定位筋弦距工具

[发明专利]一种虫草素纳米缓释囊及其制备方法-CN201410208480.0有效
发明人：卢天成;王秀然;刘洪章;张林波;李双双;刘思阳;贾宇;王岩;李雪 -专利权人：吉林农业大学
申请日： 2014-05-16 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： A61K9/51 文献下载
摘要：一种虫草素纳米缓释囊及其制备方法，涉及医药以及医药中间体化合物改性领域，解决了现有虫草素使用过程中出现的半衰期短的问题。通过将虫草素溶于弱酸性溶液得虫草素溶液，将海藻酸钠溶于碱性溶液得海藻酸钠溶液，将上述溶液按虫草素与海藻酸钠的摩尔比为1:10～10:1混合至少20min，经离心洗涤、超声分散后得虫草素纳米缓释球，将虫草素纳米缓释球与0.125mol/L的CaCl₂溶液等体积混合固化后，得直径为200nm～300nm的虫草素纳米缓释囊粉状物。本发明通过虫草素溶液与海藻酸钠溶液混合法，同时采用CaCl₂固化技术，工艺流程可操作性强，具有良好的虫草素缓释性能和抑菌效果，抑菌率可达到70％。
一种虫草纳米缓释囊及其制备方法

[发明专利]布鲁氏菌菌壳疫苗株的制备方法-CN201410143661.X有效
发明人：王兴龙;钱晶;郎需龙;卜昭阳;王秀然;陈思 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
申请日： 2014-04-11 - 公布日： 2014-07-30 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：布鲁氏菌菌壳疫苗株的制备方法，涉及分子生物学和微生物学领域，解决了现有菌壳制备方法存在的成本高而不适合大规模生产的问题，该方法为将布鲁氏菌菌株基因组特定基因的上下游同源臂的PCR产物分别克隆至pMD18-T Simple载体中，重组质粒分别经双酶切后依次连接至经酶切处理的质粒pBK-CMV-SacB中构建自杀质粒，PCR扩增温控表达质粒pBV220-E中的温控裂解部件，扩增产物经酶切处理后插入自杀质粒中；将温控裂解型自杀质粒以电转化方式转入布鲁氏菌感受态中，用卡那霉素抗性和果糖蔗糖酶基因进行正负向筛选得到布鲁氏菌菌壳疫苗株。该布鲁氏菌菌壳疫苗株具有良好的遗传稳定性、安全性、有效性和免疫原性。
布鲁氏菌疫苗制备方法

[发明专利]玉竹人参软胶囊的制备方法-CN201310406321.7有效
发明人： 王秀然;张天柱;高福星;卢天成;吕俊峰;李斌;太龙杰;成怀畅 -专利权人：吉林省泽康药业有限公司
申请日： 2013-09-09 - 公布日： 2014-01-08 - 主分类号： A23L1/29 文献下载
摘要：玉竹人参软胶囊的制备方法，属于玉竹等植物类保健食品加工领域，解决了采用水提法提取玉竹多糖存在的提取率低以及填补了现有植物类保健食品领域以玉竹人参为主要原料的免疫食品的空白的问题。该方法如下：按重量比称取玉竹和鲜人参并加入蒸馏水，粉碎，过胶体磨，升温，加入纤维素酶和半纤维素酶的混合物，酶解，加入蛋白酶，酶解，升温，水浴，过滤除渣，减压浓缩，得玉竹人参浸膏，将其制成软胶囊。利用本发明的制备方法得到的玉竹人参软胶囊成品中，玉竹多糖的提取率比水提法下的多糖提取率提高了50%以上。
玉竹人参软胶囊制备方法

[发明专利]玉竹人参口服液的制备方法-CN201310406323.6有效
发明人： 王秀然;刘思阳;卢天成;王岩;郝芳芳;张天柱;任大勇;李双双;胡薇;刘树英;姜飞拓 -专利权人：吉林农业大学
申请日： 2013-09-09 - 公布日： 2014-01-08 - 主分类号： A23L1/29 文献下载
摘要：玉竹人参口服液的制备方法，属于玉竹等植物类保健食品加工领域，解决了现有采用水提法提取玉竹多糖存在的提取率低的问题以及填补现有植物类保健食品领域以玉竹人参为主要原料的免疫食品的空白，该方法如下：按照玉竹︰鲜人参=1︰1～9︰1的重量比称取玉竹和鲜人参，加入蒸馏水，粉碎，升温，加入纤维素酶和半纤维素酶的混合物，酶解，再加入蛋白酶，酶解，加入蒸馏水，过胶体磨，浓缩，得到玉竹人参口服液。利用本发明的制备方法得到的玉竹人参口服液成品中，玉竹多糖的提取率比水提法下的多糖得率提高了30%以上。
玉竹人参口服液制备方法

[发明专利]同时检测牛羊猪犬四种布鲁氏菌的PCR试剂盒及其制备方法和使用方法-CN201310339187.3有效
发明人：王兴龙;陈思;王秀然;钱晶;郎需龙;王晓旭 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
申请日： 2013-08-06 - 公布日： 2013-11-27 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：同时检测牛羊猪犬四种布鲁氏菌的PCR试剂盒及其制备方法和使用方法，属于人畜共患传染病病原体的基因检测领域，该PCR试剂盒由PCR反应液、DNA聚合酶、阳性质控标准品和阴性质控标准品组成；PCR反应液包括鉴定牛种、羊种、猪种、犬种布鲁氏菌的四对引物和含有dNTPs、Mg2+、双蒸水的PCR缓冲液。该PCR试剂盒实用性强，可直接检测样品中污染的布鲁氏菌的种型，检测速度快，灵敏度高，灵敏度达到102cfu/mL，特异性强，可重复性好，安全可靠、快速简便，可对样品中的布鲁氏菌的种型进行定性检测，可替代传统的病原学和血清学方法。
同时检测牛羊猪犬四种布鲁氏菌 pcr 试剂盒及其制备方法使用方法

[实用新型]USB式指尖脉波计-CN201320302077.5有效
发明人：成怀畅;杨萍;王秀然;卢天成;冯朝晖 -专利权人：吉林省锐先端科技有限公司
申请日： 2013-05-29 - 公布日： 2013-11-27 - 主分类号： A61B5/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种USB式指尖脉波计，包括：外壳，USB插头，以及设置在所述外壳内部的诊脉模块；所述诊脉模块包括：反射式传感器、多功能微控制器、驱动及检测程序存储器；所述多功能微控制器包括：可控增益放大器、滤波器、基准电源、多功能微处理器。本实用新型的USB式指尖脉波计是基于开发USB设备准则的性价比极高的新型USB设备。将USB式指尖脉波计插入电脑，就可以检测脉搏波波形、心动状态、气血状态和心血管综合品质因数，电脑则扩展了筛查诊断心血管健康状态的功能。
usb 指尖脉波计

[发明专利]USB式指尖脉波计-CN201310205895.8无效
发明人：成怀畅;杨萍;王秀然;卢天成;冯朝晖 -专利权人：吉林省锐先端科技有限公司
申请日： 2013-05-29 - 公布日： 2013-09-11 - 主分类号： A61B5/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种USB式指尖脉波计，包括：外壳，USB插头，以及设置在所述外壳内部的诊脉模块；所述诊脉模块包括：反射式传感器、多功能微控制器、驱动及检测程序存储器；所述多功能微控制器包括：可控增益放大器、滤波器、基准电源、多功能微处理器。本发明的USB式指尖脉波计是基于开发USB设备准则的性价比极高的新型USB设备。将USB式指尖脉波计插入电脑，就可以检测脉搏波波形、心动状态、气血状态和心血管综合品质因数，电脑则扩展了筛查诊断心血管健康状态的功能。
usb 指尖脉波计