本发明提供一种敲除水稻OsPLS4基因的sgRNA。针对水稻OsPLS4基因设计基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列,将含有编码所述sgRNA序列的DNA片段连接到携带CRISPR/Cas9的载体中,用农杆菌介导的方法转化水稻愈伤组织,通过筛选鉴定,实现对水稻OsPLS4基因的敲除。其中,sgRNA作用位点的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过CRISPR‑CAS9技术对水稻内源基因OsPLS4进行编辑,获得了OsPLS4敲除突变体。利用本发明制备的sgRNA能高效、快速、精确靶向水稻OsPLS4基因,在基础研究(水稻早衰分子机理)和生产实践(水稻早衰品种改良和抗逆育种)上具有一定的意义。
本发明提供一种靶向敲除水稻OsAurora1基因的sgRNA。针对水稻OsAurora1(LOC_Os01g09580)基因的编码区序列,设计基于CRISPR/Cas9技术的sgRNA序列,将含有编码该sgRNA序列的DNA片段插入到携带CRISPR/Cas9的载体中,转化水稻,实现对水稻OsAurora1基因组序列的编辑与该基因的敲除。其中,sgRNA作用位点的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过CRISPR‑CAS9技术对水稻内源基因OsAurora1进行编辑,获得了OsAurora1敲除水稻植株。利用本发明制备的sgRNA能高效、快速、精确靶向水稻OsAurora1基因,在水稻细胞生物学基础研究和水稻育种生产实践上具有一定的意义。
本发明公开了一种水稻蜡质合成相关的蛋白质及其编码基因WSL5与其在水稻育种中的应用。本发明提供了一种水稻蜡质合成相关的蛋白质,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还提供了一种编码权利上述蛋白质的基因WSL5,所述基因WSL5的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。上述基因WSL5在在改良水稻蜡质含量以及水稻抗生物和非生物胁迫中的应用。本发明分离并克隆鉴定了控制水稻蜡质合成基因WSL5,并通过互补实验进行基因功能验证。图位克隆的结果表明,该基因编码了一个氧化还原酶。本发明为培育蜡质含量丰富、抗胁迫的新品种,对于解决目前水稻品种易出现后期早衰、生产受环境影响等问题具有广阔的应用前景。