本发明提供了一种用于检测副溶血弧菌K抗原基因分型的引物组SEQ ID No.1~SEQ ID No.114,所述引物组是基于多重杂交连接反应的荧光探针熔解曲线技术,根据418株副溶血弧菌的全基因组进行生物信息学方法分析以及公共数据库中18株副溶血弧菌特异基因序列分析,获取并筛选了副溶血弧菌57种K抗原的特异基因和具体的基因区域,针对所得到的副溶血弧菌57种K抗原的特异基因进行设计得到的,保证所述引物组能够基于荧光探针熔解曲线法同时检测57种副溶血弧菌K抗原基因分型,提高了副溶血弧菌的抗原基因分型的检测时间和检测准确性。
本发明属于分子检测技术领域,具体涉及用于副溶血弧菌基因分型的组合物、试剂盒和方法。本发明的组合物包括基于13种O抗原基因的12组杂交探针,每组杂交探针均包括上游杂交探针和下游杂交探针;12组上游杂交探针的序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.12所示,12组下游杂交探针的序列如SEQ ID NO.13~SEQ ID NO.24所示;其中,所述上游杂交探针1~12或下游杂交探针1~12具有熔点标签序列。在对副溶血弧菌进行基因分型时,采用本发明上述组合物作为杂交探针,能够一次性测定副溶血弧菌的13种O抗原基因型,特异性高,且简化基因分型过程。