本发明公开了一种Cas蛋白截短体、构建其的方法及其应用。所述Cas13蛋白截短体由以下(1)‑(3)中任一种组成：(1)相对如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列存在选自第623‑772位、第773‑922位、第923‑1072位、第623‑1072位、第923‑972位、第973‑1022位、第1023‑1072位、第973‑1072位、第623‑672位、第673‑722位、第723‑772位、第773‑822位、第823‑872位、第873‑922位、第1127‑1272位、第994‑1107位、第726‑827位、第263‑315位、第82‑132位、第187‑243位、第610‑661位、第593‑658位和第810‑905位的任一种缺失的截短体序列；(2)同源或异源蛋白结构域，以及(1)中所述截短体序列；(3)同源或异源蛋白结构域，(1)中所述截短体序列，以及用于连接所述蛋白结构域与所述截短体序列的连接序列。本发明的Cas蛋白截短体在保持编辑活性的同时大大减小了蛋白尺寸，便于AAV递送，具有广泛的应用前景。
本发明涉及一种靶向编辑VEGFA基因外显子区域的gRNA及其应用，属于基因编辑技术领域。所述gRNA序列靶向破坏VEGFA基因的的外显子区域，所述gRNA序列的靶向结构域序列选自SEQ ID NO:5‑21，SEQ ID NO:25‑53中任一所示基础序列，或与所述基础序列相似性≥90％的扩展序列。采用该gRNA序列，特异性靶向破坏VEGFA基因启动子区域而有效降低VEGFA mRNA水平。从而治疗癌症、年龄相关性黄斑变性、糖尿病肾病、类风湿性关节炎、牛皮癣皮肤、卵巢过度刺激综合征等有关疾病。
