本发明提供了一种鉴定布鲁氏菌病疫苗株与野毒株的引物、探针及试剂盒,所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述的试剂盒包含上述引物和探针。既可鉴别纯布鲁氏菌核酸DNA,也可鉴别组织样本等微量布鲁氏菌核酸DNA,将牛种布鲁氏菌A19‑ΔVirB12分子标记疫苗免疫样品和布鲁氏菌现有疫苗免疫样品、野毒株感染样品区分开来。本方法具有安全性高操作便捷、灵敏度高、特异性强等优点,能同时检测大量样品,对布鲁氏菌病的防控和诊断具有实际应用价值。
本发明属于分子生物学检测技术领域,公开了一种引物组合、试剂盒、扩增方法、A19疫苗检测中的应用,所述引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO.4。所述试剂盒包含有:2×Taq PCR MasterMix,10μM引物组混合液,无菌双蒸水,阳性对照品布鲁氏菌2308株DNA,阴性对照品无菌双蒸水。本发明提供的引物组及PCR试剂盒可鉴别区分自然感染的布病阳性牛和A19疫苗免疫牛。与传统的病原生化鉴定方法相比,本发明提供的试剂盒操作简便、高效特异、生物安全性高、检测结果分析易于标准化,能解决目前牛布病防控中的实际生产问题。