本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，突变至少包括如下突变位点之一：第3位、第5位、第8位、第25位、第32位、第45位、第56位、第59位、第60位、第84位、第86位、第164位、第176位、第178位、第180位、第187位、第197位、第206位、第207位、第242位、第245位、第319位、第324位等；或者转氨酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点。突变体的应用可以提高反应速率，提高酶稳定性，减少了酶用量，降低了后处理的难度，使得其能够适合工业化生产。
本发明提供了一种脯氨酸羟化酶及其应用。脯氨酸羟化酶包括(a)具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸的突变且具有脯氨酸羟化酶活性的蛋白质；或者(c)保留(b)中的一个或多个氨基酸的突变，具有脯氨酸羟化酶活性，且与(b)中蛋白质的氨基酸序列至少具有78％的同源性的蛋白质。以SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的蛋白质以及利用基因工程手段对其改造得到的突变体，具有比现有的脯氨酸羟化酶更高的催化专一性或者显著提高的催化活性。
本发明公开了一种单加氧酶突变体及其应用。该单加氧酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，突变至少包括如下突变位点之一：第49位、第60位、第61位、第144位、第145位、第146位、第147位、第167位、第169位、第189位、第246位、第247位、第280位、第284位、第285位、第286位、第287位、第328位、第330位、第332位、第382位、第427位、第428位、第429位、第430位、第431位、第432位等，本发明的单加氧酶突变体具有立体选择性大幅度提高的优势，并且酶活也有相应提高。
本发明公开了氨基酸脱氢酶突变体及其应用。该氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，突变至少包括如下突变位点之一：第64位、第94位、第133位、第137位、第148位、第168位、第173位、第183位、第191位、第207位、第229位、第248位、第255位和第282位；或者氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与发生突变的氨基酸序列具有80％以上同源性的氨基酸序列。本发明的氨基酸脱氢酶突变体具有酶活性大幅度提高的优势，其酶活相对于野生型氨基酸脱氢酶提高了大于50倍，并且酶特异性也有相应提高。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，突变至少包括如下突变位点之一：第19位、第41位、第43位、第72位、第76位、第92位、第107位、第125位、第132位、第226位、第292位、第295位和第308位、第332位；且第19位突变为丝氨酸，第41位突变为丝氨酸，第43位突变为天冬酰胺，第72位的甘氨酸突变为亮氨酸等；或者转氨酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与发生突变的氨基酸序列具有80％以上同源性的氨基酸序列。本发明转氨酶突变体大幅度降低了手性胺工业生产中的成本。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，突变的氨基酸位点选自F89、K193、P243、V234、I262、Q280、V379、R416、A417及C418中的一个或多个。具有上述至少一个突变位点的转氨酶突变体，其酶活性和/或稳定性大大提高。
