本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。其中，该转氨酶突变体具有SEQ ID NO:1所示序列发生氨基酸突变的序列，发生氨基酸突变的位点包括V242W位点。本发明的上述转氨酶突变体是在SEQ ID NO：1所示的转氨酶的基础上，通过定点突变的方法进行突变，从而改变其氨基酸序列，实现蛋白质结构和功能的改变，再通过定向筛选的方法，得到具有上述突变位点的转氨酶，本发明获得的转氨酶催化活性较高、选择性专一且底物谱广泛，具有广泛的工业化前景。
本发明公开了一种单加氧酶突变体及其应用。其中，该单加氧酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，突变至少包括如下突变位点之一：第45位、第95位、第106位、第108位、第114位、第186位、第190位、第191位、第249位、第257位、第393位、第436位、第499位、第500位、第501位、第503位、第504位、第559位和第560位。本发明的单加氧酶突变体具有酶活性大幅度提高的优势，从而大幅度降低了手性亚砜工业生产中的成本。
本发明提供了一种脯氨酸羟化酶及其应用。脯氨酸羟化酶包括(a)具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的蛋白质；(b)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸的突变且具有脯氨酸羟化酶活性的蛋白质；或者(c)保留(b)中的一个或多个氨基酸的突变，具有脯氨酸羟化酶活性，且与(b)中蛋白质的氨基酸序列至少具有78％的同源性的蛋白质。以SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的蛋白质以及利用基因工程手段对其改造得到的突变体，具有比现有的脯氨酸羟化酶更高的催化专一性或者显著提高的催化活性。
本发明公开了一种酮还原酶突变体及生产手性醇的方法。该酮还原酶突变体具有SEQ ID NO:1所示序列发生氨基酸突变的序列，突变的位点至少包括如下位点之一：第6位、第21位、第42位、第58位、第61位、第76位、第87位、第94位、第96位、第108位、第113位、第117位、第144位、第146位、第147位、第149位、第151位、第152位、第156位、第165位、第177位、第198位等。应用本发明的技术方案，酮还原酶以酮类化合物为原料，通过立体选择性地还原作用，可以高效生产手性醇，并可以选择性的拆分，降低了生产成本和后期处理难度，适合推广用于手性醇的工业生产。
