本发明涉及一种生物技术领,尤指一种基于数字PCR平台的miRNA‑106b检测试剂盒,所述的试剂盒主要包括PCR反应液、检测引物、反转录缓冲液、反转录引物和阳性对照品;所述的反转录引物为:以SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列为反转录引物Pri‑RT;所述的检测引物为:以SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列为上游引物Pri‑F1;以SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列为下游引物Pri‑R1;本发明的试剂盒中应用的反转录缓冲液和PCR缓冲液提高反转录体系RNA的上样量及PCR反应体系的上样量,有利于提高试剂盒检测的稳定性,减少加样时出现的误差;采用数字PCR技术进行检测具有更高的灵敏度和特异性、准确性,本发明配制的反应液或试剂盒可提高了检测灵敏度、准确率,对于临床上预后观察及微量病变样本的检测提供有效方法。
本申请公开一种基于微滴式数字PCR的EB病毒检测试剂盒,所述试剂盒包括:微滴式数字PCR用反应预混液;目的片段检测混合液,包括目的片段的扩增引物和探针,目的片段的扩增引物的序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,目的片段的探针的序列如SEQ ID No.3所示;内标及内标检测混合液,包括作为内标的外源重组质粒,以及所述内标的扩增引物和探针,内标的扩增引物的序列如SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示,内标的探针的序列如SEQ ID No.6所示;阳性对照预混液;阴性对照预混液;本申请优化利用数字PCR技术针对EB病毒进行绝对定量检测的成品试剂盒,为EB病毒相关疾病诊断提供准确的诊断依据。