本发明公开了一种用于包装重组人4型腺病毒的单质粒载体系统，所述载体系统含有E3区缺失的人4型腺病毒(Human Adenovirus type 4,HAdV‑4或Ad4)基因组、用于质粒在细菌内扩增的载体序列、pBR322复制原点、卡那霉素抗性基因以及复制控制序列，外源基因嵌入位点位于人4型腺病毒的包装信号之后、E1区之前。本发明还公开了所述单质粒载体系统包装重组人4型腺病毒的方法以及在疫苗和药物制备中的应用。所述载体系统可以快捷、高效地制备稳定表达外源基因的人4型腺病毒载体重组病毒，在诊断试剂盒、疫苗、基因治疗试剂盒和/或肿瘤治疗药物制备的应用等领域具有良好的应用前景。
本发明公开了一种稳定表达马尔堡包膜糖蛋白的复制型4型腺病毒载体重组病毒的制备方法及在预防马尔堡病毒病疫苗中的应用。所述重组病毒具有与人4型腺病毒(Human Adenovirus type 4,HAdV‑4 or Ad4)完全一致的颗粒结构，基因组中完全缺失腺病毒E3区，外源基因表达框嵌入腺病毒基因组包装信号之后、E1区序列之前，感染细胞后可以稳定表达马尔堡病毒Angola株包膜糖蛋白。该重组病毒免疫动物后，能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞免疫和体液免疫反应，能够在一定程度上应对世界范围内5型腺病毒载体重组疫苗预存免疫水平较高的问题。此外，该疫苗制备方法简单，可在短期内大规模生产，用于应对突发马尔堡病毒疫情和生物恐怖袭击。
