本发明公开了当归特异引物对、PCR‑RFLP试剂、PCR‑RFLP试剂盒和PCR‑RFLP检测方法。该当归特异引物对由核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的单链DNA分子和核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的单链DNA分子组成。PCR‑RFLP所用酶为限制性核酸内切酶SmlI。该PCR‑RFLP方法不仅可以检测当归植株、当归药材，还能准确检测中药配方颗粒中是否含有当归。鉴定方法准确、快捷，在鉴别当归与常见当归混伪品方面具有更高的特异性。
本发明公开了一种PpUGT6重组蛋白、上述PpUGT6重组蛋白的表达基因、表达盒、重组载体、宿主菌以及应用。PpUGT6重组蛋白包括由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽。结合具体实施例，本发明的这种PpUGT6重组蛋白对于延龄草苷具有催化能力，实现其糖基化反应，生成延龄草苷6’‑O‑葡糖苷，为甾体皂苷的糖基化研究奠定了基础，为甾体皂苷活性机制形成研究提供了理论支持。本发明首次克隆并验证了PpUGT6重组蛋白的糖基转移酶功能，在体外酶催化反应中PpUGT6重组蛋白能够催化延龄草苷生成延龄草苷6’‑O‑葡糖苷。
本发明公开了一种PpUGT5重组蛋白、上述PpUGT5重组蛋白的表达基因、表达盒、重组载体、宿主菌以及应用。PpUGT5重组蛋白包括由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽。结合具体实施例，本发明的这种PpUGT5重组蛋白对于延龄草苷具有催化6’糖基化的能力，实现其糖基化反应，生成延龄草苷6’‑O‑葡萄糖苷，为甾体皂苷的糖基化研究奠定了基础，为甾体皂苷活性机制形成研究提供了理论支持。本发明首次克隆并验证了PpUGT5重组蛋白的糖基转移酶功能，在体外，PpUGT5重组蛋白可以将延龄草苷催化合成延龄草苷6’‑O‑葡萄糖苷。
本发明公开了一种PpUGT2重组蛋白、上述PpUGT2重组蛋白的表达基因、表达盒、重组载体、宿主菌以及应用。PpUGT2重组蛋白包括由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽。结合具体实施例，本发明的这种PpUGT2重组蛋白能够催化薯蓣皂苷元的葡萄糖基化反应，将薯蓣皂苷元转化为延龄草苷，其具有糖基转移酶功能，为重楼皂苷合成提供了作用元件，可以用于重楼皂苷的合成。本发明首次克隆并验证了与重楼皂苷生物合成相关、具有糖基转移酶功能的PpUGT2重组蛋白，在体外，PpUGT2重组蛋白可以将薯蓣皂苷元转化合成延龄草苷。
本发明公开了SoSTPS5在作为倍半萜合酶中的应用。本发明公开的SoSTPS5来源于紫丁香，为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是SEQ ID No.9的蛋白质；A2)将序列表中SEQ ID No.9所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有倍半萜合酶活性的蛋白质；A3)来源于紫丁香且与A1)所述蛋白质具有98％以上同一性且具有倍半萜合酶活性的蛋白质。实验证明，本发明的SoSTPS5具有倍半萜合酶活性，可以将法尼基焦磷酸或其盐催化生成(+)‑germacrene D‑4‑ol和shyobunol，本发明的SoSTPS5及其编码基因具有很好的应用前景。
