本发明设计一种亚胺还原酶突变体在合成烟碱关键中间体（S）‑3‑（吡咯烷‑2‑基）吡啶中的应用，属于生物催化合成技术技术领域。本发明提供了一种改进的亚胺还原酶，即亚胺还原酶突变体，其氨基酸序列是SEQ ID NO:5)的突变体，可选的突变点至少包括下列位点之一：第246位A或第285位D突变为V。该亚胺还原酶突变体的酶活性高于现有技术，提高了催化还原反应的产率，缩短了反应时间。
发明涉及亚胺还原酶突变体及其在光学活性(S)‑1‑苯基‑1,2,3,4‑四氢异喹啉合成中的应用，属于生物工程技术领域。所述突变体是将如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列中的第168位谷氨酰胺、第117位缬氨酸、第210位酪氨酸、第273位丝氨酸中的一个或多个氨基酸残基替换为其它氨基酸残基所形成的新氨基酸序列的衍生蛋白质。本发明所述的亚胺还原酶突变体，能够不对称还原50g/L 1‑苯基‑3,4‑二氢异喹啉，合成相应高光学纯度(S)‑1‑苯基‑1,2,3,4‑四氢异喹啉，具有非常好的工业应用前景。
本发明涉及一种转氨酶突变体在合成沙库必曲缬沙坦钠盐（LCZ696）关键手性中间体D‑4,4’‑联苯丙氨酸中的应用，属于生物催化合成技术领域。本发明所述的突变体是SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的四联突变体，转氨酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，对应的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相比于野生型转氨酶母本，在保证产物手性纯度的情况下，单位酶活提高为约30倍，具有非常高的立体选择性和转化率，可进一步降低沙库必曲和LCZ696的工业生产成本，具有良好的工业应用价值。
本发明涉及一种转氨酶突变体在合成沙库必曲缬沙坦钠盐（LCZ696）关键手性中间体D‑4,4’‑联苯丙氨酸中的应用，属于生物催化合成技术领域。本发明所述的突变体是SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的四联突变体，转氨酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，对应的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相比于野生型转氨酶母本，在保证产物手性纯度的情况下，单位酶活提高为约30倍，具有非常高的立体选择性和转化率，可进一步降低沙库必曲和LCZ696的工业生产成本，具有良好的工业应用价值。
本发明涉及一种海茵酶突变体以及将3‑异丁基戊二酰亚胺催化水解为(R)‑(‑)‑3‑(氨甲酰甲基)‑5‑甲基己酸的应用，属于生物催化合成技术领域。本发明基于对基于Agrobacterium tumefaciens BQL9的63位、第65位和第317位改造得到海茵酶突变体，氨基酸序列如SEQ NO ID：1所示。该酶突变体酶活性高于现有技术，提高了催化还原反应的产率，缩短了反应时间。
本发明涉及一种利用微生物制备3‑甲基‑4‑硝基苯甲酸的方法，属于生物化工技术领域。本发明提供了一种重组大肠杆菌菌株，为E.coli BL21‑pRSFDuet‑1‑L163W，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，其对应的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示,以及所述重组大肠杆菌菌株在制备3‑甲基‑4‑硝基苯甲酸方面的应用。本发明提供了一种微生物法制备生产3‑甲基‑4‑硝基苯甲酸的工艺，克服了现有技术中催化剂、氧化剂价格昂贵或者污染严重或者生产工艺存在安全隐患的问题。
