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[发明专利]固定二氧化碳电合成3-羟基丁酸的工程菌及构建方法-CN202211254948.0有效
发明人：请求不公布姓名;谭扬;周明新 -专利权人：深圳中科翎碳生物科技有限公司
申请日： 2022-10-13 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用合成生物技术设计构建高效利用电能固定CO2并合成3‑羟基丁酸的工程菌的方法与应用。所述设计构建工程菌的方法是以能利用电能和CO2的电活性微生物Geobacter sulfurreducens ACL为底盘，在该底盘菌株中通过质粒方式高效表达异柠檬酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶与3‑羟基丁酸合成途径相关酶，经实验验证利用该方法所构建的菌株能高效利用电能与CO2合成3‑羟基丁酸。
固定二氧化碳合成羟基丁酸工程构建方法

[发明专利]大肠杆菌及其构建方法与在生产L-缬氨酸中的应用-CN202310809271.0有效
发明人：孟刚;张英;魏爱英;赵春光;周晓群;毕国东;苏厚波;杨立鹏 -专利权人：黑龙江伊品生物科技有限公司
申请日： 2023-07-04 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了大肠杆菌及其构建方法与在生产L‑缬氨酸中的应用。本发明发现将大肠杆菌中的yjiV基因敲除并表达ilvE与ilvD后，或者结合敲除trpR基因与表达ilvH突变蛋白，敲除lacI与lacZ基因与表达DNA聚合酶，敲除ycgH基因与表达ilvC，所得重组菌可提高L‑缬氨酸产量，可用于生产L‑缬氨酸，具有很好的应用前景。
大肠杆菌及其构建方法生产缬氨酸中的应用

[发明专利]一种基于氢氧化钠刺激的哈维弧菌同源重组基因敲除的方法-CN201910848713.6有效
发明人：邓益琴;冯娟;毛灿;张亚秋;李活 -专利权人：中国水产科学研究院南海水产研究所
申请日： 2019-09-09 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于氢氧化钠刺激的哈维弧菌同源重组基因敲除的方法。将哈维弧菌作为受体菌，与供体菌进行接合转移，经同源重组实行哈维弧菌的基因敲除，所述的哈维弧菌是经过氢氧化钠刺激处理的哈维弧菌。本发明基于氢氧化钠刺激的哈维弧菌同源重组基因敲除的方法，该方法在传统的接合转移法的技术基础上，通过对接合受体菌哈维弧菌进行氢氧化钠刺激处理，使得哈维弧菌的接合转化效率从无到有，发生质变，并对其加以应用，成功进行哈维弧菌同源重组基因敲除，这对未来哈维弧菌基因工程改造，研究其致病机制等，具有十分重要的意义。
一种基于氢氧化钠刺激哈维弧菌同源重组基因方法

[发明专利]生产胞嘧啶的重组微生物及生产胞嘧啶的方法-CN202111027172.4有效
发明人：张凯林;胡志浩;江君君;田锋;王欣彤 -专利权人：苏州华赛生物工程技术有限公司
申请日： 2019-07-05 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了生产胞嘧啶的重组微生物及生产胞嘧啶的方法，该重组微生物具有至少一个如下特征：1)重组微生物不降解或不利用胞嘧啶；2)重组微生物体外积累胞嘧啶；3)重组微生物超表达编码核糖激酶的基因；4)重组微生物能同时利用葡萄糖和核糖；5)重组微生物的编码核糖及相关化合物的调控蛋白质的基因缺失或没有功能。采用上述重组微生物菌种能够发酵单独生产胞嘧啶，或生产胞嘧啶和胞苷混合物。
生产胞嘧啶重组微生物方法

[发明专利]一种高产微生物油脂的嗜甲烷工程菌及其构建方法和应用-CN202310423786.7在审
发明人：费强;王薇廷;傅容湛 -专利权人：西安交通大学
申请日： 2023-04-19 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：一种高产微生物油脂的嗜甲烷工程菌及其构建方法和应用，首先利用基因工程的手段改造菌株，通过质粒系统表达外源甘油二酯和甘油三酯合成基因Ropap和tDGAT，得到具备转化甲烷制备甘油二酯和甘油三酯能力的工程菌株，并测定油脂含量。然后通过阻断β氧化途径、阻断甘油二酯降解途径提高油脂的产量；在此基础上，引入外源磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC和酸烯醇式丙酮酸羧激酶PCK实现二氧化碳的固定，提高甲烷制备油脂的碳转化率。通过对原始菌及工程菌株进行发酵实验，结果表明与原始菌株相比，重组菌甘油酯产量提高了10倍，油脂含量达到30％；应用于生产微生物甘油二酯和甘油三酯方面、沼气生产微生物油脂方面、制备航空生物燃料和/或医用保健品中的原料。
一种高产微生物油脂甲烷工程及其构建方法应用

[发明专利]一种在大肠杆菌表达系统中高效表达外源蛋白的方法及其应用-CN202010096475.0有效
发明人：田克恭;李鹏昊;张许科 -专利权人：普莱柯生物工程股份有限公司
申请日： 2020-02-17 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效表达外源蛋白的大肠杆菌构建方法及其应用，其中，所述方法包括：步骤(1)BL21(DE3)lpxM基因的敲除；步骤(2)将tig基因插入步骤(1)得到的BL21(DE3)lpxM基因缺失株；(3)重组载体pET28a‑Rcodon的构建；(4)外源蛋白基因克隆至步骤(3)得到的重组载体pET28a‑Rcodon；(5)将步骤(4)所得重组载体转化步骤(2)得到的菌株；以及步骤(6)外源蛋白的收获。本发明方法使得外源蛋白高效表达，能较大肠杆菌常规表达显著提高外源蛋白的表达量，内毒素含量大大降低，且本发明方法可应用到多种外源蛋白的高效表达，可广泛适用于真核生物来源的蛋白在内的多种兽医疫苗蛋白，具有广泛的适用范围。
一种大肠杆菌表达系统高效蛋白方法及其应用

[发明专利]产L-缬氨酸工程菌及构建方法与应用-CN202310809270.6有效
发明人：张英;孟刚;魏爱英;赵春光;周晓群;毕国东;杨立鹏;蔡卫卫 -专利权人：黑龙江伊品生物科技有限公司
申请日： 2023-07-04 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了产L‑缬氨酸工程菌及构建方法与应用。本发明发现将大肠杆菌中的yjiT基因敲除并表达brnF与brnE后，或者结合敲除yjiV基因与表达ilvE与ilvD，敲除trpR基因与表达ilvH突变蛋白，敲除lacI与lacZ基因与表达DNA聚合酶，敲除ycgH基因与表达ilvC，所得重组菌可提高L‑缬氨酸产量，可用于生产L‑缬氨酸，具有很好的应用前景。
缬氨酸工程构建方法应用

[发明专利]一种全细胞催化生产1,6-己二醇的方法、重组微生物及其应用-CN202210204772.1有效
发明人：陈振;朱强 -专利权人：清华大学
申请日： 2022-03-03 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及生物化工技术领域，具体公开了一种全细胞催化生产1,6‑己二醇的方法、重组微生物及其应用。本发明的重组微生物与出发菌株相比，过表达醛还原酶yahk，以及表达羧酸还原酶MpCAR和4'‑磷酸泛酰氨基转移酶sfp，所述出发菌株为大肠杆菌。本发明通过在大肠杆菌中引入外源羧酸还原酶和4'‑磷酸泛酰氨基转移酶，并过表达醛还原酶获得的重组大肠杆菌进行全细胞催化，可以在温和的条件下利用1,6‑己二酸生产1,6‑己二醇，具有十分广阔的应用前景。
一种细胞催化生产己二醇方法重组微生物及其应用

[发明专利]含有醇脱氢酶突变体基因的工程菌及其应用-CN202310914824.9在审
发明人：方诩;李宾;韩丽娟 -专利权人：山东恒鲁生物科技有限公司
申请日： 2023-07-25 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了含有醇脱氢酶突变体基因的工程菌及其应用。本发明技术领域涉及含有醇脱氢酶突变体的基因工程菌及其在合成稀有糖方面的应用。所述基因工程菌，由醇脱氢酶突变体基因构建入芽孢杆菌或酿酒酵母获得，所述醇脱氢酶突变体，选自如SEQ ID NO:1所示PDH酶的如下突变中的一种：D36A/I37R、D36G/I37R、D36R/I37R、D36H/I37R、D36K/I37R、D36I/I37R、D36F/I37R、A14T/D36A/I37R、或A14T/D36G/I37R，或如SEQ ID NO:2所示GDH醇脱氢酶如下突变：E42A。本发明所述基因工程菌，具有提高的合成塔格糖活性。
含有脱氢酶突变体基因工程及其应用

[发明专利]高产L-半胱氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202310808901.2在审
发明人：柳志强;杨辉;吴梓丹;张博;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2023-07-04 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及微生物代谢工程技术领域，尤其涉及高产L‑半胱氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。采用组合的辅因子工程策略，通过对大肠杆菌内源性NADPH再生基因的筛选，提高L‑半胱氨酸工程菌株中NADPH的供给，促进硫代谢途径的代谢通量，提高L‑半胱氨酸的生产。随后，通过引入NADP‑依赖型甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶，修改L‑半胱氨酸工程菌株中糖酵解途径的辅因子偏好性，通过和碳代谢偶联的方式提高NADPH的再生，改善L‑半胱氨酸合成途径的碳代谢与硫代谢之间平衡。本发明中构建的基因工程菌的L‑半胱氨酸产量得到了显著的提升，为实现L‑半胱氨酸微生物发酵法的工业化生产提供了有效的代谢工程改造方法和具有高产L‑半胱氨酸的基因工程菌。
高产半胱氨酸基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种敲除大肠杆菌maa基因和lacA基因提高β-熊果苷产量的方法-CN202310863778.4在审
发明人：申晓林;袁其朋;安宁;王佳;孙新晓 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2023-07-14 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种敲除大肠杆菌maa基因和lacA基因提高β‑熊果苷产量的方法，属于基因工程技术领域。本方法利用的CRISPRCas9的方法敲除产β‑熊果苷大肠杆菌副产物途径的麦芽糖O‑乙酰基转移酶基因(maa)和半乳糖苷O‑乙酰基转换酶基因(lacA)提高了β‑熊果苷的产量。敲除菌好氧条件下发酵葡萄糖合成β‑熊果苷，消除了6‑O‑乙酰基熊果苷，β‑熊果苷的产量达到了40.54g/L，有效提高了β‑熊果苷的产量。
一种大肠杆菌 maa 基因 laca 提高熊果苷产量方法

[发明专利]表达核糖体失活蛋白的乳酸菌及其在抗轮状病毒中的应用-CN202310854579.7在审
发明人：王春凤;牛天明;杨金龙;曹欣;石春卫;杨文涛;杨桂连;叶丽萍;冯玺泽;范书慧 -专利权人：吉林农业大学
申请日： 2023-07-12 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本申请提供一种表达核糖体失活蛋白的乳酸菌及其在抗轮状病毒中的应用。所述乳酸菌内整合有核糖体失活蛋白基因，其中，所述核糖体失活蛋白基因为核糖体失活蛋白基因PAP或核糖体失活蛋白基因B17。本发明所述乳酸菌能高效表达PAP和B17抗原蛋白，具有良好的免疫原性，能够诱导黏膜免疫、细胞免疫和体液免疫应答，可用于防治轮状病毒感染，具有良好的实际应用价值。
表达核糖体蛋白乳酸菌及其轮状病毒中的应用

[发明专利]用于构建和检测生物活性剂的基因编码系统-CN202310617118.8在审
发明人： J·福克斯;A·萨卡尔;A·洪都塞;E·金姆 -专利权人：科罗拉多州立大学董事会法人团体
申请日： 2019-07-08 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程的领域。特别地，本发明涉及产生生物活性剂的操纵子的构建。例如，可构建操纵子以产生控制生物化学途径蛋白质(例如，蛋白磷酸酶、激酶和/或蛋白酶)功能的试剂。这种试剂可包括用于研究或控制与磷酸酶途径或表达水平中的异常相关的磷酸酶功能中的抑制剂和调节剂。融合蛋白，比如光活化的蛋白磷酸酶，可被基因编码且被表达为光控开关磷酸酶。提供用于控制活细胞内的磷酸酶功能或鉴定与细胞信号传导相关的蛋白磷酸酶的小分子抑制剂/活化剂/调节剂分子的系统。
用于构建检测生物活性剂基因编码系统

[发明专利]一种产D-阿洛酮糖的基因工程菌及其构建方法和应用-CN202310336878.1在审
发明人：齐向辉;汤馨睿;丛宏日;赵梅;尤瓦;魏辉;翟彼得 -专利权人：江苏大学
申请日： 2023-03-31 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种产D‑阿洛酮糖的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域；本发明通过基因工程手段以pP43NMK穿梭质粒为载体，在枯草芽孢杆菌WB800N中构建表达D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶(DAE)的基因工程菌；所述基因工程菌能够用于转化D‑果糖制备D‑阿洛酮糖；本发明通过优化启动子有效提高D‑果糖的转化效率，具有很好的应用前景。
一种阿洛酮糖基因工程及其构建方法应用

[发明专利]无动物源成分的质粒培养基-CN202311092502.7在审
发明人：张满;董长贵;王洋;孙钟帅;苏敏 -专利权人：百力格生物科技（上海）股份有限公司
申请日： 2023-08-29 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一种无动物源成分的质粒培养基，所述质粒培养基以酵母提取物、甘油、磷酸氢二钾和磷酸二氢钾作为基础培养基，加入铵盐，使得所述质粒培养基中碳氮摩尔比在4.5:1‑2.6:1；所述质粒培养基中含有2‑4g/L硫酸镁，含有由氯化钙和柠檬酸盐或柠檬酸组成的促核酸合成剂，氯化钙和柠檬酸盐或柠檬酸的摩尔比为1:1‑1:2.5，所述促核酸合成剂浓度为0.5‑2g/L；所述质粒培养基还包括乙醇，甘油和乙醇共同作为所述质粒培养基碳源，甘油和乙醇的摩尔比为9:1‑4:1。本发明的培养基是一种无动物源成分的高产超螺旋质粒培养基，提升质粒发酵效率的同时提高超螺旋质粒比，减少后续纯化的难度，拓展了培养基的应用范围。
动物成分质粒培养基