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[发明专利]一种重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法和应用-CN202110294510.4有效
发明人：应汉杰;牛欢青;宋佳睿;闵志迪;陈勇;刘庆国;柳东 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-03-19 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法和应用，该毕赤酵母基因工程菌是通过在毕赤酵母菌中过表达转录抑制因子和激活因子HSF1构建得到的。所述构建方法包括如下步骤：（1）对毕赤酵母菌基因组进行PCR扩增得到HSF1基因片段；（2）将HSF1基因片段克隆到表达质粒上，得到重组质粒；（3）将线性化的重组质粒导入毕赤酵母菌中，筛选得到毕赤酵母基因工程菌。毕赤酵母基因工程菌能够有效提高自身生物膜成膜能力，使得重组毕赤酵母在单次固定化发酵条件下产酶的酶活力比游离发酵的出发菌提高了28.3％，发酵周期缩短了36.6%。重组菌能够稳定连续进行至少七批次的固定化发酵产酶，经过七批次固定化发酵后，重组菌发酵产酶的酶活比出发菌高出约7倍。
一种重组酵母基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一株敲除Cln3基因的酿酒酵母基因工程菌及其构建方法和应用-CN202110102085.4有效
发明人：应汉杰;蒋颖;陈勇;赵伟;张涛;朱家庆;梁偲策;余斌 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-01-26 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开一株敲除Cln3基因的酿酒酵母基因工程菌，所述酿酒酵母基因工程菌由原始酿酒酵母利用CRISPR‑Cas9技术敲除基因Cln3后改造而成，敲除Cln3基因的酿酒酵母基因工程菌对比原始酿酒酵母菌株在游离发酵中絮凝特性明显增强，在固定化发酵中形成的生物被膜增多，增加了生物产量，缩短了发酵周期，提高了发酵效率。
一株敲 cln3 基因酿酒酵母基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种产虫草素及其衍生物3’-脱氧肌苷的工程菌株及其制备方法和应用-CN202210463738.6有效
发明人：李倩;谭慧萍;冯宝民;李秀平;王亮;程杨好;李想;韦大鹏;阚拓;李晨阳;蒋荣帅 -专利权人：大连大学
申请日： 2022-04-29 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明属于基因工程与过程工程领域，公开了一种产虫草素及其衍生物3’‑脱氧肌苷的工程菌株及其制备方法和应用。包括密码子优化基因Cm1、Cm2、基因扩增与回收片段、甲醇诱导启动子及终止子片段、表达载体连入基因后转入毕赤酵母筛选，得到本发明保护的毕赤酵母工程菌株，该工程菌株可应用于生产虫草素及其衍生物。由本发明制备方法制备的工程菌株在生产虫草素及其衍生物上优势巨大，由于利用特有的蛹虫草菌株产出特有Cm1、Cm2基因，产虫草素效率提升巨大，且后续可实现利用二氧化碳生产虫草素及其衍生物3’‑脱氧肌苷的绿色工艺。
一种虫草及其衍生物脱氧工程菌株制备方法应用

[发明专利]一株过表达Gis4的酿酒酵母基因工程菌及其构建方法和应用-CN202110096375.2有效
发明人：应汉杰;蒋颖;陈勇;梁偲策;张涛;朱家庆;赵伟;余斌 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-01-25 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一株过表达Gis4基因的酿酒酵母基因工程菌，该菌株由原始酿酒酵母的Gis4基因过表达后改造得到。由于原始菌株在固定化发酵中菌体聚集过多且聚集体不成熟，电阻较高，阻碍了传质传导，导致其发酵周期的加长，而过表达Gis4基因的酿酒酵母基因工程菌对比原始酿酒酵母菌株在游离发酵中絮凝特性明显减弱，在固定化发酵中细胞粘附聚集情况减少，黏附性降低，游离细胞增多，加强了传质传导，缩短了发酵周期。
表达 gis4 酿酒酵母基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种胞外转运维生素D3前体角鲨烯的酿酒酵母菌株构建及其应用-CN202110926222.6有效
发明人：刘龙;陈坚;吕雪芹;堵国成;李江华;刘延峰;刘家恒;金柯 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-08-12 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种胞外转运维生素D3前体角鲨烯的酿酒酵母菌株构建及其应用，属于发酵工程技术领域。本发明首先构建了一株高产角鲨烯的重组酿酒酵母菌株Z1O3，所述重组酿酒酵母强化表达了3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、异戊烯基焦磷酸异构酶、法尼基焦磷酸合酶、内质网大小调节因子的相关基因INO2、Pdr5蛋白和Osh3蛋白；并且敲除了ROX1基因；对其进行摇瓶发酵时，该菌株胞外十二烷中角鲨烯含量达到893.58mg/L；而在发酵罐中培养，该菌株胞外十二烷中角鲨烯含量可达到6995.81mg/L，由本发明构建的重组菌株不仅具有角鲨烯胞外转运能力，且具有更强的角鲨烯生产性能，具有广阔的应用前景。
一种外转维生素 d3 前体角鲨烯酿酒酵母菌株构建及其应用

[发明专利]一株敲除Sok2的酿酒酵母基因工程菌及其构建方法和应用-CN202110096407.9有效
发明人：应汉杰;蒋颖;陈勇;梁偲策;朱家庆;张涛;赵伟 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-01-25 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开一株敲除Sok2的酿酒酵母基因工程菌，其由原始酿酒酵母的Sok2基因失活后改造得到。本发明得到的酿酒酵母基因工程菌具有比原始菌更强的成膜能力，能够更好的应用于固定化发酵领域所述酿酒酵母具有比原始菌更强的成膜能力，能够更好的应用于固定化发酵领域。
一株敲 sok2 酿酒酵母基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种分泌热休克转录因子突变体的重组毕赤酵母及其构建方法和应用-CN202310582768.3在审
发明人：李承;姜睿康;薛怡芸;李振;张天元 -专利权人：苏州聚维元创生物科技有限公司
申请日： 2023-05-23 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种分泌热休克转录因子突变体的重组毕赤酵母及其构建方法和应用，热休克转录因子来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，所述热休克转录因子突变体为突变体Hsf1R206S，所述突变体Hsf1R206S为热休克转录因子1Hsf1的第206位的精氨酸突变为丝氨酸的突变体。本发明的重组毕赤酵母可以提高外源蛋白表达量，有利于毕赤酵母作为酶制剂生产菌株的广发应用，具体的，本发明的重组毕赤酵母在生产木聚糖酶时，相对于原菌种，木聚糖酶的酶活力增加32％，蛋白浓度增加41％。
一种分泌休克转录因子突变体重组酵母及其构建方法应用

[发明专利]高产2-岩藻糖基乳糖的工程菌株及其构建方法与应用-CN202310628277.8在审
发明人：祁庆生;张妍;刘萌萌 -专利权人：山东大学
申请日： 2023-05-30 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，涉及高产2'‑岩藻糖基乳糖的工程菌株及其构建方法与应用。本发明通过代谢工程改造使得解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)具有吸收乳糖及在细胞内合成GDP‑L‑岩藻糖的能力，并通过表达融合Ub标签的α‑1,2‑岩藻糖基转移酶使细胞能够提高2'‑岩藻糖基乳糖的产量，随后通过增强GDP‑D‑甘露糖合成途径及NADPH再生途径，所获得的重组解脂耶氏酵母菌株具有高产2'‑岩藻糖基乳糖的能力。
高产岩藻糖基乳糖工程菌株及其构建方法应用

[发明专利]一株高产磷脂酰丝氨酸的酿酒酵母工程菌株、构建方法及应用-CN202310832456.3在审
发明人：王敏;屠琳娜;杨春燕;喻雅琪;夏梦雷;申雁冰 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2023-07-07 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，公开了一株高产磷脂酰丝氨酸的酿酒酵母工程菌株，所述酿酒酵母工程菌株是在酿酒酵母宿主菌中过表达SEQ ID NO.1所示的YML115C基因所得，YML115C基因所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所构建的酿酒酵母工程菌株在发酵24h后，磷脂酰丝氨酸含量达到7.94mg/gDCW，是野生型菌株的4.36倍。本发明所述工程菌株不但磷脂酰丝氨酸产量得到了提高，发酵条件较为简单，降低投资成本，具有广阔的应用前景。
高产磷脂丝氨酸酿酒酵母工程菌株构建方法应用

[发明专利]合成阿魏酸的酵母菌株和构建方法及其在制备阿魏酸及胡椒代谢物中的应用-CN202211487643.4在审
发明人：金哲浩;于涛 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2022-11-25 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及合成阿魏酸的酵母菌株和构建方法及其在制备阿魏酸及胡椒代谢物中的应用。该菌株以酿酒酵母为底盘菌株，并过表达如下基因：PahpaB、SehpaC和AtCOMT。在酿酒酵母体内整合咖啡酸合成关键酶基因(PahpaB和SehpaC)和阿魏酸合成关键酶基因(AtCOMT)，获得阿魏酸产量较高的重组菌株。本研究构建全新的阿魏酸合成重组酵母细胞，通过代谢改造提高了阿魏酸生物合成产量。借助该酿酒酵母细胞工厂挖掘了阿魏酸衍生的胡椒次生代谢产物合成的关键酶基因(PnPKS,PnOMT,PnNAT)功能，构建了能够生物合成具有药理活性产物的工程菌株，同时提供了类似化合物生物法生产的方法与技术。
合成阿魏酸酵母菌株构建方法及其制备胡椒代谢物中的应用

[发明专利]一种酿酒酵母工程菌及其应用-CN202111331555.0有效
发明人：李丽;刘国明;易萍;唐杰;孙健;盛金凤;周主贵;叶冬青;李昌宝;何雪梅;郑凤锦;辛明;唐雅园;零东宁;李志春;李杰民;杨莹;覃翠钠;王雪峰;陈茜;杨兆杏;向煜;肖占仕 -专利权人：广西壮族自治区农业科学院
申请日： 2021-11-11 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种酿酒酵母工程菌及其应用，本申请的课题组从芒果酒发酵常用的酿酒酵母Lalvin EC1118出发，分离得到了单倍体菌株。在此基础上，通过关键基因敲除片段的获取、酿酒酵母感受态细胞制备、关键基因缺失突变体验证、单倍体酵母配合后，利用新霉素G418抗性基因片段替代酵母菌Lalvin EC1118的YCL018W基因，成功获得了双倍体的酿酒酵母工程菌；经过实验验证，在采用相同品种芒果酒酿造原料、发酵温度、菌种添加量、可溶固形物含量的发酵条件下，本申请的工程菌使得芒果果酒中的异戊醇含量降低，从而降低了芒果酒的苦味，有效提高了芒果酒的品质。
一种酿酒酵母工程及其应用

[发明专利]一种毕赤酵母甲酸盐营养缺陷型菌株及其制备方法和应用-CN202310570768.1在审
发明人：杨艳坤;李康;杨少杰;徐海;张贝宁;白仲虎 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-05-19 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种毕赤酵母甲酸盐营养缺陷型菌株及其制备方法和应用，其包括：毕赤酵母中包含一个缺失fh和/或gd的质粒。本发明提供的菌株能够在甲酸代谢中，基于K.phaffii.GS115内源甲酸同化途径的关键蛋白进行改进，针对K.phaffii.GS115菌株的甲酸代谢进行了改进。本发明提供的菌株能够实现甲酸盐营养缺陷型菌株的制备，表明了相应极影在甲酸同化途径中的重要作用。
一种酵母甲酸营养缺陷菌株及其制备方法应用

[发明专利]一种生产角鲨烯的重组菌株及其构建方法以及应用-CN202111145425.8有效
发明人：魏东芝;王风清;朱占涛;杜蒙蒙;张格格 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2021-09-28 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产角鲨烯的重组菌株及其构建方法以及应用。包括以下步骤：以酿酒酵母为出发菌株，首先在线粒体内重构甲羟戊酸途径构建线粒体工程菌株，然后在所述线粒体工程菌株细胞质内强化甲羟戊酸合成以显著改善菌株生长，最后在此基础上进行细胞质工程策略优化，通过线粒体与细胞质双工程联合优化获得高产角鲨烯的重组菌株。本发明利用酿酒酵母细胞质和线粒体联合调控策略使角鲨烯的产量产生了叠加效果，同时解决了线粒体工程菌株生长差的问题，大幅度提高了酵母生产角鲨烯的能力，甚至超过20g/L。本发明得到的重组菌株适用于工业化生产角鲨烯以及其他萜类化合物，为角鲨烯的生物合成提供了强有力的研究基础。
一种生产角鲨烯重组菌株及其构建方法以及应用

[发明专利]一种重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法与在产木聚糖酶中的应用-CN202110029601.5有效
发明人：应汉杰;牛欢青;宋佳睿;闵志迪;陈勇;刘庆国;柳东 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-01-11 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法与在产木聚糖酶中的应用。所述重组毕赤酵母基因工程菌是在所述毕赤酵母菌中过表达凝集素蛋白基因LMAN2。上述重组菌加强了毕赤酵母菌的生物成膜能力，解决现有技术中毕赤酵母菌成膜能力弱，不能用于连续固定化发酵的问题。具体地，在游离发酵条件下毕赤酵母基因工程菌产木聚糖酶酶活比原始菌提高了48.9％；在单次固定化发酵条件下毕赤酵母基因工程菌产木聚糖酶酶活比原始菌提高了38.8％，且重组菌能够稳定连续进行至少七批次的固定化发酵产酶。
一种重组酵母基因工程及其构建方法聚糖中的应用

[发明专利]一株高产重组蛋白的酵母基因工程菌及其构建方法和应用-CN202210361480.9有效
发明人：黄明涛;林叶萍;肖楚凡;薛松绿;刘秀妨 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2022-04-07 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一株高产重组蛋白的酵母基因工程菌及其制备方法，该酵母基因工程菌是对酵母出发菌株进行以下一种以上的操作后得到：敲除CBC1基因、敲除RRP6基因、弱化Ypt1p的表达、强化蛋白激酶Kin1p的表达或增加HAC1 mRNA 3’BE元件数量。本发明的酵母基因工程菌可使重组蛋白的产率提高30％以上。不同于直接过表达重组蛋白或提高重组蛋白拷贝数等传统方法，该酵母基因工程菌仅从出发菌底盘细胞自身出发，围绕UPR响应相关靶点调控而展开，针对性地解决制约蛋白分泌的首要问题，即蛋白分泌压力的产生。该酵母基因工程菌用于提高其他高经济价值蛋白产量具有较强的潜力，具备广阔的应用前景。
高产重组蛋白酵母基因工程及其构建方法应用