本发明公开了一种表达大口黑鲈弹状病毒G蛋白的重组酵母及其制备疫苗应用,特点是重组酵母为转化了pYD1‑G重组质粒的酿酒酵母,命名为EBY100/pYD1‑G,所述的pYD1‑G重组质粒能在酵母表面展示系统表达MSRV‑G蛋白,所述的MSRV‑G蛋白的基因片段的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示,该重组酵母的制备方法包括以下步骤:(1)MSRV‑G的克隆与扩增;(2)重组质粒pYD1‑G的构建;(3)重组酵母EBY100/pYD1‑G的分子构建,该重组酵母在制备大口黑鲈弹状病毒疫苗中的应用,优点是高保护率且安全、有效、使用方便。