[发明专利]疫苗组合物

说明书

本发明涉及抗体探针以及这样一些探针在检测及纯化若干防护和诊断抗原方法中的应用、它们的制备及在形成疫苗组合物中的用途。

现有技术中，在发展控制动物（包括家畜）的寄生物，细菌及其它感染的疫苗方面已投入了很大的努力。但是在过去的五年中，没有取得多少进步，尽管在真核与原核生物体中产生大量外来产物的关联技术发展很快。例如在动物的主要病原感染中鉴别出防护性抗原仍然是产生疫苗的主要障碍。

其主要原因之一是例如寄生物的巨大复杂性，它们可能具有哺乳动物的高达10%的遗传信息，因而能够在它们生命周期的不同阶段产生一大批的产物，其中只有少数几个可能对于产生有效的疫苗是重要的，在大多数情况下，研究人员面临的是数以百计的可能的抗原。使人困惑的中心问题是哪些是可诱发宿主防护性免疫应答的寄生物抗原。对于以相当大的困难、昂贵的代价及长的时间、依靠期望与灵感选择出的寄生物抗原进行克隆，从理论上讲有可能发展出一种有效的疫苗。然而在大多数情况下，这种做法是失败的。

在现有技术的寄生物感染中，重点一直放在用全血清抗体作为“探针”对粗寄生物抗原混合物，寄生物CDNA、或基因组库进行的筛选上。血清中含有大量抗其它病原体和抗原的抗体。此外，大多数抗寄生物的抗体是对准非防护性抗原的。

改进用于筛选粗的寄生物抗原混合物或寄生物CDNA库的抗体探针一直没有取得什么成绩，尽管这对于检测抗原和在它们随后的分子克隆过程中监测这些抗原的防护性抗原决定部位是极端重要的。

例如，捻转血矛线虫（Haemonchus        contortus）是一种寄生于绵羊皱胃（第四胃）中的寄生虫。晚期幼虫和成熟寄生虫以全血为食。由于这是一种潜在的致命疾病，这种寄生虫对澳大利亚绵羊产业造成巨大的经济损失，并在海外造成巨大损失。尽管造成了这些损失，但是在现有技术中一直没有研制出一种抗这种寄生虫的成功疫苗。

干酪性淋巴结炎（缩写CLA，也称为干酪腺）是一种由假结核棒状杆菌（Corynebacterium        pseudotuberculosis）（syn.绵羊棒状杆菌C.ovis）引起的绵羊和山羊的慢性感染。现有技术中已知一种复杂的无细胞CLA疫苗（GLANVAC，Commonwealth        Serum        laboratories），它广泛地被单独或作为一种6组分的抗菌疫苗的一部分（6合1）被服用。由这种疫苗取得的保护作用归功于失活的毒素（即类毒素）成分。当这种毒素在还原条件下12.5%SDS-PDGE时，其相对分子量约为31千道尔顿。虽然这种现有的疫苗确实可以产生一些防护作用，但这种疫苗是复杂而昂贵的，所以大量感染仍会发生。

肝片吸虫（Fasciola        hepatica）（肝吸虫）是一种在绵羊和牛的肝及胆管中出现的寄生虫感染。肝吸虫会对绵羊及牛产业引起慢性和急性损失。在现有技术中已知有许多种预防及治疗方法，但是已证明它们的效果是有限的，所以肝吸虫仍是一种慢性兽医疾病。

绦虫（Taenia        hydatigena）也是一种在绵羊肝中出现的寄生虫感染。它通过被感染的狗从一只动物转到另一只动物，并且会对绵羊产业造成一些损失。现有技术中一直没有研制出一种抗此寄生虫的成功疫苗。

因此，本发明的一个目的是克服或至少减轻现有技术中的一个或多个难点。

因此，本发明的第一个方面是提供一种产生至少一种抗病原体抗体的方法，该方法包括：

由病原体或病原体提取物感染或激发的动物提供一个生物的样品;

从该生物样品中分离细胞;

在合适的培养基中对细胞体外培养;以及

收集所述细胞产生的抗体。

可以取生物样品的动物可以是任何合适的类型。取生物样品的动物可以是免疫动物。可以在用病原体感染激发该免疫动物后短时间内取得生物样品。这种动物可以是包括人在内的哺乳动物。这种哺乳动物可以是驯养的动物，例如绵羊或牛。

在下面的描述中，将涉及寄生虫及细菌免疫原的鉴定方法，该方法对于绵羊和牛的疫病特别是对绦虫（绦虫cestode），捻转血矛虫（namatode），肝片吸虫（trematode）和细菌病原体假结棒状杆菌的寄生感染是重要的。应该理解，这些免疫原和病原体仅仅是用于说明的，而这种方法通常可逆用于包括人在内的动物。具体地说这里描述的这种方法可用于检测自身免疫疾病中的免疫原。