[其他]用解脂亚罗威阿酵母转化株表达和分泌异源蛋白质

权利要求书

1、一种通过解脂亚罗威阿酵母培养菌，产生和分泌异源蛋白质的方法，包括：

①将表达载体引入所述的解脂亚罗威阿酵母中，表达载体包括编码异源于所述解脂亚罗威阿酵母、解脂亚罗威阿酵母基因或解脂亚罗威阿酵母启动子、解脂亚罗威阿酵母基因的信号和转录终止密码子DNA顺序的蛋白质的DNA顺序。

②将所产生的①的解脂亚罗威阿酵母转化株置于适宜的营养培养基中进行培养；和

③回收异源蛋白质。

2、一种通过解脂亚罗威阿酵母培养菌，产生异源蛋白质的方法，包括：

①将表达载体引入所述解脂亚罗威阿酵母，表达载体包括与解脂亚罗威阿酵母异源的蛋白质的DNA编码和至少下述之一的表达载体;LEU2基因及其启动子或终止密码子顺序、XPR2基因、启动子、信号、prol-、pro2-或XPR2基因的终止密码子顺序;

②将所产生的①的解脂亚罗威阿酵母转化株置于适宜的营养培养基中进行培养;和

③回收该异源蛋白质。

3、根据权利要求2所述方法，其中所述基因是XPR2基因或LEU2基因。

4、根据权利要求3所述方法，其中所述异源蛋白质DNA顺序是凝乳酶原或人体过敏毒素C5a顺序。

5、一种产生异源蛋白质的方法，包括将具有ATCC-20780鉴别特征的解脂亚罗威阿酵母转化株置于适宜的营养培养基中进行培养。

6、一种产生异源蛋白质的方法，包括将具有ATCC20779鉴别特征的解脂亚罗威阿酵母转化株置于适宜的营养培养基中进行培养。

7、一种产生异源蛋白质的方法，包括将具有ATCC20778鉴别特征的解脂亚罗威阿酵母转化株置于适宜的营养培养基中进行培养。

8、一种产生异源蛋白质的方法，包括将具有ATCC20777鉴别特征的解脂亚罗威阿酵母转化株置于适宜的营养培养基中进行培养。

9、根据权利要求3所述的方法，其中异源蛋白质基因被插在XPR2基因的启动子和终止密码子顺序之间。

10、根据权利要求7所述的方法，其中异源蛋白质的基因是凝乳酶原或人体过敏毒素C5a基因。

11、一种制造不产生碱性蛋白酶的解脂亚罗威阿酵母转化株的方法，包括用XPR表达结构转化解脂亚罗威阿酵母的XPR⁺菌株。

12、一种检测具有在XPR2基因上整合的载体DNA的解脂亚罗威阿酵母转化株的方法，包括：①用XPR表达结构转化解脂亚罗威阿酵母的XPR⁺菌株;②筛选在失去碱性蛋白酶活性①中产生的转化株。

13、根据权利要求12所述方法，其中XPR⁺解脂亚罗威阿酵母菌株是用未切割的质粒PLS-3DNA或用Sna BⅠ消化的pls-3DNA转化的。

14、根据权利要求12所述方法，其中所述解脂亚罗威阿酵母具有解脂亚罗威阿酵母ATCC20688鉴别特征。

15、制备解脂亚罗威阿酵母转化株的方法，包括将表达载体整合到含有与异源载体DNA同系区的解脂亚罗威阿酵母转化株，所述同系区包括在所述解脂亚罗威阿酵母整合转化期间用作信息接受部位的外源DNA。

16、产生异源蛋白质的方法，包括在适宜的营养培养基中培养具有ATCC20795鉴别特征的解脂亚罗威阿酵母转化株。

17、产生异源蛋白质的方法，包括培养含有与异源载体DNA同系区的解脂亚罗威阿酵母转化株，所述同系区包括在所述解脂亚罗威阿酵母整合转化期间用作信息接受部位的外源DNA。

18、根据权利要求17产生异源蛋白质的方法，其中同系区是由pBR322衍生物的或是它的一个衍生物。