[其他]用重组DNA技术制备DNA、RNA、肽、多肽或蛋白质的方法

权利要求书

1、通过微生物法产生肽或多肽的方法，其特征在于至少有一部分是由随机的合成多聚核苷酸组成的基因可在一种普通培养基中同时产生，如此获得的基因被导入宿主细胞中，含有这些基因的转化宿主细胞的独立无性繁殖系同时被培养以便无性繁殖那些随机基因并导致由这些随机基因各自所表达的蛋白质的产生，对这样的转化宿主细胞的无性繁殖系以鉴定那些产生至少具有一种专一性的肽或多肽的无性繁殖系的方式进行选择或筛选，分离那些如此鉴定出的无性繁殖系，然后以产生至少一种具有上述特性的肽或多肽的方式培养之。

2、按照权项1的方法，其特征在于这些基因是由四种类型的脱氧磷酸核苷酸A，C，G，和T的随机共聚作用而产生的，随机共聚作用是从一个预先线性化的表达载体的两个末端开始的，然后通过这样的方式形成粘性末端，即产生包含具有两个随机序列的一个表达载体分子的随机DNA的第一股，所述两个随机序列的3′末端是互补的，随后合成随机DNA的第二股。

3、按照权项1的方法，其特征在于基因是由那些没有粘性末端的双股寡核苷酸的随机共聚作用产生的，其方式为形成随机DNA的碎片，然后在一个预先线性化的表达载体中连接这些碎片。

4、按照权项2或3的方法，基特征在于表达载体是一个质粘。

5、按照权项4的方法，其特征在于表达载体是pUC8。

6、按照权项2或3的方法，其特征在于表达载体是病毒DNA的碎片。

7、按照权项2或3的方法，其特征在于表达载体是质粘和病毒DNA的一种杂化物。

8、按照权项1到7的方法，其特征在于宿主细胞是原核细胞。

9、按照权项1到7的方法，其特征在于宿主细胞是真核细胞。

10、按照权项8的方法，其特征在于，细胞选自HB101和C600中。

11、按照权项3的方法，其特征在于寡核苷酸形成一组四文八聚体。

12、按照权项11的方法，其殊征在于，四文八聚体是下列一组：

5′GGAATTCC  3′

5′GGTCGACC  3′

5′CAAGCTTG  3′

5′CCATATGG  3′

5′CATCGATG  3′。

13、按照权项3的方法，其特征在于寡核苷酸形成一组四文七聚体。

14、按照权项13的方法，其特征在于，四文七聚体是下列一组：

5′XTCGCGA  3′

5′XCTGCAG  3′

5′RGGTACC  3′

其中X＝A，G，C，或T，R＝A或T。

15、按照权项4和权项12或14之一的方法，其特征在于，首先分离和纯化由培养转化宿主细胞的独立无性繁殖系得到的转化DNA，转化的宿主细胞是以在权项11或权项13中限定的方式获得的，然后至少用一个对应着存在于这些四文八聚体和七聚体中的特异限制位占的限制性内切酶切割纯化的DNA，但所用的表达载体上没有该特异限制性位点，此后用DNA连接酶同时处理如此得到的线性化随机DNA碎片的整体，以这样的方法产生一种含有新的随机序列的新的DNA整体，利用这种新的转化DNA整体转化宿主细胞并无性繁殖这样的基因，最后对新的转化细胞无性繁殖系进行选择或筛选和分离，并培育这些无性繁殖系以便产生至少一种具有所需特性的肽或多肽。

16、按照权项1的方法，其特征在于所述的特性为催化一种给定化学反应的能力。

17、按照权项1产生几种肽和/或多肽的方法，其特征在于，所述的特性为催化由给定的起始化合物直至形成至少一个目标化合物的一系列反应的能力。

18、按照权项16产生由一个以上反身自催化的肽和/或多肽组成的整体的方法，其特征在于所述的特性为催化由氨基酸和/或寡肽开始的整体本身的合成的能力。

19、按照权项1的方法，其特征在于，所述的特性为选样修饰一种给定化合物的化学性质或/和生物学性质的能力。

20、按照权项19的方法，其特征在于，所述的特性为选择修饰一种多肽的催化活性的能力。