[发明专利]用于生产L-缬氨酸的大肠杆菌及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 202310809281.4 | 申请日： | 2023-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN116555155B | 公开（公告）日： | 2023-10-24 |
| 发明（设计）人： | 周晓群;魏爱英;孟刚;赵春光;张晓琴;毕国东;杨立鹏;蔡卫卫;王攀 | 申请（专利权）人： | 黑龙江伊品生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/31;C12N15/54;C12N15/53;C12N15/60;C12P13/08;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 魏少伟 |
| 地址： | 166200 黑龙江省大庆*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 生产 缬氨酸 大肠杆菌 及其 构建 方法 应用 | ||
1.用于生产缬氨酸的大肠杆菌，其特征在于：所述大肠杆菌为对受体大肠杆菌进行改造得到的重组菌；所述改造包括A5）；
A5）包括A51）和A52）：
A51）敲除所述受体大肠杆菌的ycgH基因，抑制所述ycgH基因的表达或抑制所述ycgH基因编码的蛋白质的活性；
A52）增加所述受体大肠杆菌中ilvC基因编码蛋白质的含量或增强所述ilvC基因编码蛋白质的活性。
2.根据权利要求1所述的大肠杆菌，其特征在于：所述ilvC基因来源于大肠杆菌（
3.根据权利要求2所述的大肠杆菌，其特征在于：所述ilvC基因编码序列表中SEQ IDNo.12所示的蛋白质。
4.根据权利要求3所述的大肠杆菌，其特征在于：所述ilvC基因为序列表中SEQ IDNo.11的第794-2269位所示的DNA分子。
5.根据权利要求1-4中任一所述的大肠杆菌，其特征在于：所述改造还包括A1）、A2）、A3）和A4）：
A1）包括A11）、A12）和A13）：
A11）敲除所述受体大肠杆菌的yjiT基因，抑制所述yjiT基因的表达或抑制所述yjiT基因编码的蛋白质的活性；
A12）增加所述受体大肠杆菌中brnF基因编码蛋白质的含量或增强所述brnF基因编码蛋白质的活性；
A13）增加所述受体大肠杆菌中brnE基因编码蛋白质的含量或增强所述brnE基因编码蛋白质的活性；
A2）包括A21）、A22）和A23）：
A21）敲除所述受体大肠杆菌的yjiV基因，抑制所述yjiV基因的表达或抑制所述yjiV基因编码的蛋白质的活性；
A22）增加所述受体大肠杆菌中ilvE基因编码蛋白质的含量或增强所述ilvE基因编码蛋白质的活性；
A23）增加所述受体大肠杆菌中ilvD基因编码蛋白质的含量或增强所述ilvD基因编码蛋白质的活性；
A3）包括A31）和A32）：
A31）敲除所述受体大肠杆菌的trpR基因，抑制所述trpR基因的表达或抑制所述trpR基因编码的蛋白质的活性；
A32）增加所述受体大肠杆菌中ilvHG14D 、S17F基因编码蛋白质的含量或增强所述ilvHG14D 、S17F基因编码蛋白质的活性；所述ilvHG14D 、S17F基因由将ilvH基因中第14位甘氨酸密码子替换为天冬氨酸密码子、第17位丝氨酸密码子替换为苯丙氨酸密码子得到；
A4）包括A41）、A42）和A43）：
A41）敲除所述受体大肠杆菌的lacI基因，抑制所述lacI基因的表达或抑制所述lacI基因编码的蛋白质的活性；
A42）敲除所述受体大肠杆菌的lacZ基因，抑制所述lacZ基因的表达或抑制所述lacZ基因编码的蛋白质的活性；
A43）增加所述受体大肠杆菌中DNA聚合酶的含量或增强所述DNA聚合酶的活性；
所述brnF基因与所述brnE基因来源于谷氨酸棒状杆菌（
所述ilvE基因来源于枯草芽孢杆菌（
6.根据权利要求5所述的大肠杆菌，其特征在于：
所述ilvD基因来源于大肠杆菌（
所述ilvH基因来源于大肠杆菌（
所述DNA聚合酶来源于大肠杆菌（
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