[发明专利]不结球白菜的分子标记引物及其应用在审
| 申请号： | 202310479862.6 | 申请日： | 2023-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN116334294A | 公开（公告）日： | 2023-06-27 |
| 发明（设计）人： | 汤伟华;刘叶琼;潘颀;孙朋朋;全张妮;叶彬彬 | 申请（专利权）人： | 江苏农林职业技术学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳;叶江栩 |
| 地址： | 212400 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 不结球 白菜 分子 标记 引物 及其 应用 | ||
1.一种不结球白菜紫叶基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种检测权利要求1所述的不结球白菜紫叶基因的分子标记引物。
3.根据权利要求2所述的分子标记引物，其特征在于，所述分子标记引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2～3所示。
4.一种权利要求3所述的分子标记引物在鉴定不结球白菜紫叶品种中的应用。
5.一种鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待鉴定样品的基因组DNA；
(2)将步骤(1)得到的基因组DNA作为模板，利用权利要求3所述的分子标记引物进行PCR扩增；
(3)对步骤(2)得到的扩增产物进行聚丙烯酰胺电泳分离，如果分离的产物中含有150bp的片段，则说明待鉴定样品不结球白菜的叶片为紫色。
6.根据权利要求5所述的鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，其特征在于，步骤(2)中所用的扩增体系为：DNA模板、分子标记引物、2×Primer Star、去离子水。
7.根据权利要求6所述的鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，其特征在于，步骤(2)中所用的扩增体系为：50ng/μL DNA模板1μL、10μM Pur54引物各0.5μL、2×Primer Star5μL、去离子水3μL，总反应体系为10μL。
8.根据权利要求5所述的鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，其特征在于，步骤(2)中所用的扩增程序为：95℃预变性2min，98℃变性30s，59.8℃退火30s，72℃延伸30s，72℃后延伸10min，35个循环，冷却至4℃保存。
9.一种紫叶不结球白菜的选育方法，其特征在于，所述的紫叶不结球白菜含有权利要求1所述的不结球白菜紫叶基因。
10.根据权利要求9所述的选育方法，其特征在于，在育种过程中采用权利要求3所述的分子标记引物选择不结球白菜颜色的性状。
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