[发明专利]硬毛粗盖孔菌内参基因及其引物和应用在审
| 申请号： | 202310428624.2 | 申请日： | 2023-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN116426683A | 公开（公告）日： | 2023-07-14 |
| 发明（设计）人： | 王丽宁;黄清铧;王庆福 | 申请（专利权）人： | 广东省科学院生物与医学工程研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 陈洁娣;刘明星 |
| 地址： | 510000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 硬毛粗盖孔菌 内参 基因 及其 引物 应用 | ||
1.硬毛粗盖孔菌的内参基因，其特征在于，包括泛素结合酶1、自噬蛋白Atg8、泛素结合酶2、钙调磷酸酯酶和真菌蛋白激酶基因；泛素结合酶1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；自噬蛋白Atg8基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；泛素结合酶2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；钙调磷酸酯酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；真菌蛋白激酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
2.用于扩增权利要求1所述内参基因的引物组，其特征在于，所述的引物组序列如下：
泛素结合酶1基因的扩增引物为：
F:GTGGCGTGTTCTTCCTGTCT；
R:CGTTCTTGTATAGATGAGCGATGT；
自噬蛋白Atg8基因的扩增引物为：
F:GCCAGTTCGTCTATGTTATCCG；
R:CGTCCTTGTGCTCCTCGTAT；
泛素结合酶2基因的扩增引物为：
F:CGAGTGAACTTATGAGCCTAATGA；
R:CGAACTTAATGGCAGGAGGTG；
钙调磷酸酯酶基因的扩增引物为：
F:GCCTTCCTATCGCTGCTATTG；
R:ACTGACTCCTCGTTCGTTGT；
真菌蛋白激酶基因的扩增引物为：
F:GCCTCTGTTCTCGTTCTCCAA；
R:CATCCGCATCCATAATCACTCTC。
3.检测权利要求1所述的内参基因的试剂在硬毛粗盖孔菌内参基因定量检测中的应用。
4.权利要求2所述的引物组在硬毛粗盖孔菌内参基因定量检测中的应用。
5.权利要求2所述的引物组在制备硬毛粗盖孔菌基因表达分析的试剂盒中的应用。
6.一种试剂盒，其特征在于，包含权利要求2所述的引物组。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，还包含PCR所用的其他试剂。
8.权利要求1所述的内参基因、权利要求2所述的引物组或权利要求6所述的试剂盒在硬毛粗盖孔菌基因表达分析中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，是在硬毛粗盖孔菌不同表达水平的基因的定量检测中的应用。
10.一种硬毛粗盖孔菌不同表达水平的基因的定量检测方法，其特征在于，以权利要求1所述的内参基因进行不同表达水平的基因的定量检测，所述的真菌蛋白激酶基因作为低表达基因定量检测的内参基因；所述的钙调磷酸酯酶基因作为中低表达基因定量检测的内参基因；所述的泛素结合酶2基因作为中等表达基因定量检测的内参基因；所述的自噬蛋白Atg8基因作为中高表达基因定量检测的内参基因；所述的泛素结合酶1基因作为高表达基因定量检测的内参基因。
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