[发明专利]一种核酸快速检测方法在审
| 申请号： | 202310422283.8 | 申请日： | 2023-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN116377035A | 公开（公告）日： | 2023-07-04 |
| 发明（设计）人： | 石坚;吴文巍;罗成 | 申请（专利权）人： | 吴文巍 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人： | 郎祺 |
| 地址： | 200050 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 快速 检测 方法 | ||
1.一种核酸快速检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，取样品放入样品袋，加5-10倍体积的裂解液，封闭袋口，进行匀浆操作，得待测样品；
步骤二，将待测样品置于反应腔内，在恒温加热条件下，与反应腔内的恒温扩增试剂反应；
步骤三，使反应后的待测样品流至试剂条上，并且通过检测槽观察试剂条的情况，不同环境的检测可通过更换不同的抗原，实现目视检测和荧光检测。
2.根据权利要求1所述的核酸快速检测方法，其特征在于，所述恒温扩增试剂包括酶、引物、探针和缓冲液组分，其中，2种引物或探针标记了特定抗原A和抗原B。
3.根据权利要求2所述的核酸快速检测方法，其特征在于，所述恒温扩增试剂包括：正向外围引物1～50pmol；反向外围引物1～50pmol；正向交叉引物10～500pmol；反向交叉引物10～500pmol；正向探针1～100pmol；反向探针1～100pmol；DNA聚合酶5～50U；反转录酶0.5～8U；dNTP 10～300nmol；BSA 0.1～5μg；缓冲液组分，1～1000mM Tris-HCl，1～50mM(NH4)2SO4，1～100mM KCl，1～10mM MgSO4，0.01～1wt％20。
4.根据权利要求2所述的核酸快速检测方法，其特征在于，所述抗原A和抗原B为地高辛、生物素、荧光标记FAM中任意2种。
5.根据权利要求4所述的核酸快速检测方法，其特征在于，地高辛标记对应试纸条中使用地高辛抗体；生物素标记对应试纸条中使用SA；FAM标记对应试纸条中使用anti-FAM抗体。
6.根据权利要求1所述的核酸快速检测方法，其特征在于，所述步骤二中，加热时间为15～30分钟。
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