[发明专利]一种大豆肽-β-胡萝卜素纳米颗粒的制备方法

说明书

本发明涉及以大豆分离蛋白、β‑胡萝卜素为主要原料制备一种可溶性大豆肽‑β‑胡萝卜素纳米颗粒的方法。本发明采取的是酶解法和乳化‑蒸发法构建并制得复合纳米颗粒。本发明利用大豆蛋白的水解物大豆肽构建纳米颗粒，并封装β‑胡萝卜素获得大豆肽‑β‑胡萝卜素纳米复合物，此复合物不仅具有降血压、降血脂、抗疲劳、促进肌肉损伤修复、缓解运动疲劳等功能性质且更易消化吸收，还很好的保留了β‑胡萝卜素所含有的生物活性成分，改善其溶解性和光稳定性、热稳定性及贮存的储藏稳定性。本发明很好地解决了β‑胡萝卜素的水不溶性、稳定性差及生物利用率低等问题，将其作为配料加入到日常食品中可以发挥更多的营养价值。

技术领域

本发明涉及一种可溶性大豆肽-β-胡萝卜素纳米颗粒的制备方法，运用酶解自组装法构建可溶性大豆肽纳米颗粒，乳化-蒸发法封装β-胡萝卜素，涉及利用大豆肽对β-胡萝卜素的功能进行开发制备食品营养强化剂的领域。

背景技术

β-胡萝卜素作为一种有价值的营养素，在食品和制药工业中被用作脂溶性天然色素着色剂。此外，β-胡萝卜素是维生素A的主要前体之一，它具有改善生理健康功能的诸多优势：优异的抗氧化活性；改善眼部健康、保护皮肤和毛发；增强免疫细胞活性和数量、调节免疫系统、预防多种疾病。由于β-胡萝卜素是不饱和且不溶于水的生物活性物质，化学上不稳定且生物利用率低，因此不能直接添加到食品中。通过构建可溶性大豆肽纳米颗粒对β-胡萝卜素进行封装，可以很好的保留其所含有的生物活性成分，改善其溶解性和贮存的储藏稳定性。

大豆蛋白是一种常见的植物性蛋白质，其含有人体所需要的丰富的氨基酸。在营养价值上，可与动物蛋白等同，在基因结构上也最接近人体氨基酸，是最具营养的植物蛋白质。大豆蛋白经酶水解后形成的大豆蛋白水解物，是一个富含大豆肽类和蛋白的混合物。大豆肽具有降血压、降血脂、抗疲劳、促进肌肉损伤修复、缓解运动疲劳等功能性质，而且大豆肽的分子量小、水溶性高，具有比大豆蛋白更易消化吸收、供能快速、受热不易凝固等优点。且大豆肽具有两亲性，制备而成的纳米颗粒粒径均一、稳定性好，具有高表面积与体积比以及独特的物理和化学性质，可以作为β-胡萝卜素的载体，与β-胡萝卜素有很好的相容性。

本发明使用大豆肽作为β-胡萝卜素的纳米颗粒，通过酶解法与乳化-蒸发法的技术，使β-胡萝卜素很好的分散于颗粒中，以提高其稳定性和生物利用率。

发明内容

1、本发明提供了一种酶解法和乳化-蒸发法构建一种可溶性大豆肽-β-胡萝卜素纳米颗粒的制备方法：

(1)其特征在于，该方法包括以下步骤：步骤1)：取一定量的大豆分离蛋白溶于去离子水中，精确称量，在室温下充分分散，配制成蛋白分散溶液。步骤2)：将样品进行分割，分别加入不同蛋白酶。步骤3)：在各酶的最佳条件下进行酶解，通过邻苯二甲醛法获得不同水解度的大豆蛋白水解物。步骤4)：水解后，调节每个样品的pH至中性，然后立即灭活酶，放入冰浴中冷却至室温。步骤5)：根据所得数据绘制粒径分布图，以粒径(nm)为x轴，纳米颗粒体积(％)为y轴，分析纳米颗粒的粒径变化规律及分布情况。步骤6)：将大豆肽纳米颗粒和不同浓度的β-胡萝卜素等体积混合。步骤7)：将两种物质放入高速均质机中，均质，微流化循环处理进行二次循环。步骤8)：旋转蒸发系统中，蒸发食品级乙醇溶剂，然后借助超速离心收集固化的可溶性大豆肽-β-胡萝卜素纳米颗粒。

(2)进一步限定，大豆分离蛋白在水中要分散2h，得到3％(w/v)的蛋白分散溶液。

(3)进一步限定，酶的添加量为0.5％(酶/底物，固体酶:w/w，液体酶:v/w)，包括碱性蛋白酶、风味蛋白酶和胃蛋白酶，水解度分别为2％、4％、6％、8％。

(4)进一步限定，水解结束后调节样品pH至7.0，采取沸水浴10min的方式灭活酶。

(5)进一步限定，β-胡萝卜素的浓度为0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.15μg/mL、0.20μg/mL。