[发明专利]胞内抗体及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种胞内抗体，其特征在于，所述胞内抗体包括识别mHTT的单克隆抗体的可变区重链的片段和溶酶体膜相关蛋白Ⅰ的信号序列，所述可变区重链的片段包括SEQ.ID NO.1～3中任意一个所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的胞内抗体，其特征在于，所述溶酶体膜相关蛋白Ⅰ的信号序列包括SEQ.ID NO.4所示的氨基酸序列。

3.一种胞内抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

构建得到包含有SEQ.ID NO.5～7中任意一个所示的核苷酸序列，以及包含有SEQ.IDNO.8所示的核苷酸序列的重组表达载体质粒；

向受体菌或受体细胞中转化所述重组表达载体质粒，培养表达，获得胞内抗体。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述重组表达载体质粒构建方法包括如下步骤：

合成目的片段，所述目的片段包含SEQ.ID NO.5～7中任意一个所示的核苷酸序列，且包含有SEQ.ID NO.8所示的核苷酸序列；

以目标片段为模板，以SEQ.ID NO.9～10、SEQ.ID NO.18～19和SEQ.ID NO.20～21中任意一组所示的核苷酸序列为引物，扩增目的片段并且添加EcoRⅠ和AgeⅠ酶切位点；

将扩增的目的片段连入表达载体中，获得重组表达载体质粒；

可选地，所述目的片段还包含有HA标签蛋白的核苷酸序列；可选地，包含至少两个HA标签蛋白的核苷酸序列，所述HA标签蛋白的核苷酸序列如SEQ.ID NO.11所示。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述目的片段的核苷酸序列为SEQ.IDNO.12～14中任意一个所示的序列。

6.编码表达权利要求1或2所述胞内抗体的基因。

7.根据权利要求6所述的基因，其特征在于，包含SEQ.ID NO.5～7中任意一个所示的核苷酸序列，以及包含SEQ.ID NO.8所示的核苷酸序列。

8.一种重组表达载体，其特征在于，包含权利要求6或7中所述的基因。

9.权利要求1或2所述的胞内抗体或权利要求3～6中任一项所述的制备方法获得的胞内抗体或权利要求6或7所述的基因或权利要求8所述的重组表达载体在如下任一项中的用途：

(1)在制备特异性识别和/或特异性结合突变HTT蛋白及其聚集体的产品中的用途；

(2)在制备降解突变HTT蛋白及其聚集体的产品中的用途；

(3)在制备恢复溶酶体功能的产品中的用途；

(4)在制备治疗神经退行性疾病的药物中的用途。

10.一种小分子药物，其特征在于，所述小分子药物包括权利要求1或2所述的胞内抗体、由权利要求3～6任一项所述的制备方法获得的胞内抗体、权利要求6或7所述的基因或权利要求8所述的重组表达载体。