[发明专利]用于人类CYP2D6基因分型的引物组合物、试剂盒及设计方法

权利要求书

1.一种用于人类CYP2D6基因分型的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物用于特异性扩增CYP2D6基因的SNP位点，所述引物组合物包括野生型引物、突变型引物和公用引物，所述公用引物用于区分与CYP2D6基因高度同源的CYP2D7和CYP2D8P基因。

2.如权利要求1所述的用于人类CYP2D6基因分型的引物组合物，其特征在于，所述CYP2D6基因的SNP位点包括c.1846GA、c.100CT、c.1758GA、c.2988GA。

3.如权利要求2所述的用于人类CYP2D6基因分型的引物组合物，其特征在于，所述公用引物的序列如下：

CYP2D6基因c.1846GA位点：

反向公用引物：TCCAGCCCCGGCACCTCACG；

CYP2D6基因c.100CT位点：

正向公用引物：GGTGTGTCCAGAGGAGCCCGT；

CYP2D6基因c.1758GA位点：

反向公用引物：TCCAGCCCCGGCACCTCACG；

CYP2D6基因c.2988GA位点：

反向公用引物：GGCTTACAGGATCCTGGT。

4.如权利要求1所述的用于人类CYP2D6基因分型的引物组合物，其特征在于，所述野生型引物和突变型引物的错配率为5％-12％。

5.如权利要求2所述的用于人类CYP2D6基因分型的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物的序列如下：

CYP2D6基因c.1846GA位点：

正向野生型引物：CCGTATCTCCCACCCCTAG，

正向突变型引物：CCGTATCTCCCACCCTCAA，

反向公用引物：TCCAGCCCCGGCACCTCACG；

CYP2D6基因c.100CT位点：

反向野生型引物：GTGGCAGTGGGCCTGTTGG，

反向突变型引物：GGCAGTGGGCCTGGTGAGA，

正向公用引物：GGTGTGTCCAGAGGAGCCCGT；

CYP2D6基因c.1758GA位点：

正向野生型引物：CGCCTTCGCCAACCACTCAG，

正向突变型引物：CCACCTTCGCCAACCACTACA，

反向公用引物：TCCAGCCCCGGCACCTCACG；

CYP2D6基因c.2988GA位点：

正向野生型引物：GCAGAGGCCGAGGAAGG，

正向突变型引物：TGCAGTGGCCGAGGGTGA，

反向公用引物：GGCTTACAGGATCCTGGT。

6.一种用于人类CYP2D6基因分型检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括上述权利要求1-5任一所述的用于人类CYP2D6基因分型的引物组合物。

7.如权利要求6所述的用于人类CYP2D6基因分型检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括针对CYP2D6基因的SNP位点的Taqman探针、内标基因的引物和探针、Taq酶、dNTPs、缓冲溶液，所述Taqman探针序列如下：

c.1846GA位点：

探针：ACGCCCCTTTCGCCCCAACG，

c.100CT位点：

探针：TTGGCGCCGGTGCATCAGGTC，

c.1758GA位点：

探针：CTTTGTGCCCTTCTGCCCATCACC，

c.2988GA位点：

探针：TACAGGCGGGGGCCCATGAACTTT。

8.如权利要求7所述的用于人类CYP2D6基因分型检测的试剂盒，其特征在于，所述内标基因为RPPH，RPPH的引物及探针序列如下：

正向引物：TCATCAGTGGGGCCACGA，

反向引物：CTGTTAGGGCCGCCTCTGGC，

探针：TGCGTCCTGTCACTCCACTCCCATGT。