[发明专利]虫草素一水合物晶体及其制备方法

说明书

本发明属于医药精制领域，具体涉及虫草素一水合物晶体及其制备方法。从含有溶解虫草素的待纯化虫草素混合液中，通过超声耦合混合二元溶剂降温结晶、超声耦合反溶剂结晶或超声耦合反应结晶得到虫草素一水合物晶型I晶体；或者从含有溶解虫草素的待纯化虫草素混合液中，通过反溶剂结晶得到虫草素一水合物晶型II晶体。与目前报道的已知的两个无水晶型相比，本发明制备的含有结晶水的虫草素一水合物晶体因为内部氢键作用增强，有利于减缓虫草素的崩解溶出，延长虫草素片剂崩解释放时间，从而有望延长虫草素作用时间，达到延长半衰期的目的。本发明的结晶方法简单易控，得到的虫草素一水合物晶体稳定性好、收率高，产品可长期稳定储存。

技术领域

本发明属于医药精制领域，具体涉及虫草素一水合物晶体及其制备方法。

背景技术

虫草素(Cordycepin)，又称冬虫夏草素、虫草菌素、蛹虫草菌素，别名：3'-脱氧腺苷(3'-deoxy-adenosin，以下简称3'-dA)，是含氮配糖体的核酸衔生物——嘌呤类生物碱；3'-dA的N-糖苷键较稳定，但在剧烈水解条件下(pH1)N-糖苷键会断裂生成腺嘌呤。主要作用是抑制核苷或核苷酸的磷酸化而生成二磷酸盐和三磷酸盐的衍生物，从而抑制肿瘤细胞核酸的合成，虫草素的分子结构式如下所示：

虫草素溶于热水、热乙醇和甲醇，不溶于苯、乙醚、氯仿等非极性强的纯有机试剂，紫外光的最大吸收波长为259nm，99％紫外吸光度比值：A280 nm/A260 nm为0.2163～0.2200。

虫草素具有广泛的药理活性作用，包括舒张血管、降低血压、减慢心率、刺激肾上腺素、生成甾体激素、抑制血小板凝聚、镇静、抗惊厥、抗氧化、抗炎抗肿瘤等众多药理作用，在美容抗衰老、保健品、医药和科研等领域都有很好的前景，成为当下研究热点。但是，天然虫草资源稀缺，其中虫草素含量甚微，价格昂贵，提取工艺繁琐且损失严重，故难以天然虫草直接作为原料提取虫草素，且2001年，冬虫夏草进入国家二级保护植物名单，卫生部明令禁止其用于保健品原料，2010年，国家质检总局明确表示，冬虫夏草严禁作为生产普通食品的原料使用，故只能用人工合成法进行替换；目前对虫草素的合成方法包括化学合成、微生物发酵、体外合成和生物合成；而化学合成工艺尚处于探索阶段，国外确实有报道虫草素能够人工合成，但反应过程复杂，条件苛刻且产量极低。目前国内的提取方法主要是利用蛹虫草子实体进行虫草素的提取，如专利CN104072559B中经过超声水提、离子交换树脂纯化、反渗透浓缩、蒸发结晶从蛹虫草子实体中获得虫草素纯品；专利CN201611066467.1中利用虫草大米培养基残基，进行醇析、离子交换树脂多次纯化、甲醇重结晶获得虫草素纯品；专利CN201510129431.2采取直接将发酵液经大孔树脂吸附、硅胶柱层析分离纯化获得纯品；这些专利中涉及的制备操作步骤繁多，且会产生废液导致水质污染，且最终的产品不稳定，结晶度低，堆积密度小，不利于后期进行成药和制剂；传统的结晶方法为直接在5℃以下冷冻直至结晶析出，该法虽对设备要求较低，但由于易爆发成核，导致颗粒聚集、杂质包裹严重，晶体粒径参差不齐，堆积密度小，结晶度低，稳定性差；工业生产中也有采用多次低温醇析法结晶，但其工艺流程长，操作繁琐，溶剂消耗量大，所得的产品纯度和收率较低。另外，已经报道的两个虫草素无水合物晶型：无水晶型Form I(Acta Cryst.(1980).B36,2185-2187)，属单斜晶系，P2₁空间群，于水溶液中通过蒸发结晶得到的；无水晶型Form II(ActaCryst.(1997).C53,1694-1696)，属正交晶系，P2₁2₁2空间群，在室温下缓慢蒸发水溶液获得的板状单晶；国内目前对虫草素结晶方面的文献报道较少，结晶工艺优化作为改善虫草素产品品质的重要手段研究尚浅，对于虫草素用药半衰期短的难题尚未解决，本发明旨在提出虫草素一水晶型用以延缓虫草素释放得以延长作用时间。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供了两种晶型的虫草素一水合物晶体及其制备工艺，其中制备得到的虫草素一水合物晶型II晶体产品有助于虫草素缓慢释放，是用药的优势晶型。