[发明专利]一种检测猴痘病毒B.1 lineage的引物探针组、试剂盒及应用在审
| 申请号： | 202310110018.6 | 申请日： | 2023-02-14 |
| 公开（公告）号： | CN116004924A | 公开（公告）日： | 2023-04-25 |
| 发明（设计）人： | 谭文杰;霍恕婷;黄保英;吴长城;王文玲;赵莉;任姣;陆柔剑 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人： | 解辉 |
| 地址： | 102206 北京市昌平区昌*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 痘病毒 lineage 引物 探针 试剂盒 应用 | ||
1.一种检测猴痘病毒B.1lineage的引物探针组，其特征在于，所述引物探针组包括以下正反向引物序列和两条探针序列：
正向引物序列：5'-AGTACACAGACCTCCACCAC-3'；
反向引物序列：5'-AGTAATTGACCTACTGGTCTAGGG-3'；
第一探针序列：5'HEX-AAACCAGTCCAAAATTCGCCACAA-BHQ13'；
第二探针序列：5'FAM-AGTCCAAAATCCGCCA-MGB 3'。
2.根据权利要求1所述的引物探针组，其特征在于，所述第一探针和第二探针有一个核苷酸位点的差异。
3.一种检测猴痘病毒B.1lineage的多重荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的正反向引物序列和两条探针序列。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述正反向引物序列和两条探针序列在同一反应体系中进行反应。
5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括多重荧光定量PCR反应体系，20μL所述反应体系包括如下组分：10μL 2×ChamQ Geno-SNP Probe MasterMix，0.4μL浓度为10μM的正向引物，0.4μL浓度为10μM的反向引物，0.4μL浓度为10μM的第一探针，0.4μL浓度为10μM的第二探针，2μL模板DNA，6.4μL无菌无酶水。
6.一种检测猴痘病毒B.1lineage的数字PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的正反向引物序列和两条探针序列。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述正反向引物序列和两条探针序列在同一反应体系中进行反应。
8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括数字PCR反应体系，35μL所述反应体系包括如下组分：7μL Digital LightCycler 5×DNAMaster，0.7μL浓度为10μM的正向引物，0.7μL浓度为10μM的反向引物，0.7μL浓度为10μM的第一探针，0.7μL浓度为10μM的第二探针，3.5μL模板DNA，21.7μL无菌无酶水。
9.一种非诊断目的的检测猴痘病毒B.1lineage的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
提取待测样品的DNA，以所述待测样品的DNA作为模板，利用权利要求1所述的引物探针组进行多重荧光定量PCR或数字PCR，即可检测猴痘病毒B.1lineage。
10.权利要求1或2所述的引物探针组或权利要求3-8任意一项所述的试剂盒在快速检测并区分猴痘病毒B.1lineage中的应用。
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