[发明专利]一种利用复合微生物转化三七茎叶制备含稀有皂苷的发酵提取物的方法

权利要求书

1.一种利用复合微生物转化三七茎叶制备含稀有皂苷的发酵提取物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)三七茎叶、溶剂和缓冲液配制成发酵培养基；

2)将复合发酵菌活化后，接种到所述发酵培养基中，进行发酵处理；

3)提纯，获得含有Rd、Rg3、Rh2、F2和C-K五种稀有皂苷的发酵提取物；

其中，按质量百分比计，所述复合发酵菌包含植物乳杆菌10％～35％、双歧杆菌7％～30％、嗜酸乳杆菌7％～30％、凝结芽孢杆菌0％～20％、酿酒酵母10％～35％、产朊假丝酵母0％～20％。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌JYLP326、所述双歧杆菌为两歧双歧杆菌TMC3115、所述嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌LA-G80、所述凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌BC01、所述酿酒酵母为酿酒酵母VL1。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述复合发酵菌由质量比为1-3:1-3:1:1:1-3:1的植物乳杆菌JYLP326、两歧双歧杆菌TMC3115、嗜酸乳杆菌LA-G80、凝结芽孢杆菌BC01、酿酒酵母VL1和产朊假丝酵母组成。

4.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述发酵培养基中，三七茎叶的质量百分比为10％～15％。

5.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，步骤2)中，所述复合发酵菌活化后，菌株数量至少达到10⁷cfu/mL。

6.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，步骤2)中，按质量计，所述复合发酵菌的接种比例2％～4％。

7.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，步骤1)中，配制发酵培养基，具体包括以下步骤：选取三七茎叶，粉碎，过60目筛，按一定比例加入蒸馏水制备混悬液，加入缓冲溶液，调节pH值为5～6，在115℃下灭菌30分钟。

8.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，步骤2)中，复合发酵菌的活化，具体包括以下步骤：将复合发酵菌接种到添加5％蔗糖的MRS液体培养基中，在30℃～37℃下培养72～90h。

9.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，步骤3)中，所述提纯，具体包括以下步骤：将发酵处理获得的发酵物粉碎，乙醇为溶剂，在50℃～75℃回流1～3小时，过滤，干燥。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述乙醇的浓度为40％～60％，所述乙醇和发酵物的质量比例为3～6。