[发明专利]工程大肠杆菌合成牡荆素和荭草苷的应用

权利要求书

1.一株构建高产尿苷二磷酸葡萄糖的工程菌，其特征在于，所述工程菌以大肠杆菌为宿主，敲除或抑制基因组上糖酵解途径关键基因以及UDPG合成路径的旁路基因，游离表达磷酸葡萄糖变位酶、UTP-葡萄糖-1-磷酸尿苷酸转移酶和UDP尿苷激酶；

所述糖酵解途径关键基因包括6-磷酸葡萄糖异构酶编码基因pgi和/或6-磷酸葡萄糖1-脱氢酶编码基因zwf；所述UDPG合成路径的旁路基因包括UDP-葡萄糖6-脱氢酶编码基因ugd，葡萄糖脱氢酶编码基因gcd和/或海藻糖-6-磷酸合酶编码基因otsA。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，利用质粒pRSFDuet-1、pCDFDuet-1或pACYCDuet-1游离表达磷酸葡萄糖变位酶编码基因、UTP-葡萄糖-1-磷酸尿苷酸转移酶编码基因和/或UDP尿苷激酶编码基因。

3.一种高产糖基产物的重组菌株，其特征在于，所述重组菌株是在权利要求所述的工程菌的基础上，游离表达金莲花来源的8位碳苷糖基转移酶TcCGT1。

4.根据权利要求3所述的重组菌株，其特征在于，利用质粒pCDFDuet-1表达TcCGT1。

5.一种提高糖基产物产量的方法，其特征在于，所述方法为以大肠杆菌为宿主，敲除或抑制基因组上糖酵解途径关键基因以及UDPG合成路径的旁路基因，游离表达磷酸葡萄糖变位酶、UTP-葡萄糖-1-磷酸尿苷酸转移酶、金莲花来源的8位碳苷糖基转移酶TcCGT1和UDP尿苷激酶；

所述糖酵解途径关键基因包括6-磷酸葡萄糖异构酶编码基因pgi和/或6-磷酸葡萄糖1-脱氢酶编码基因zwf；所述UDPG合成路径的旁路基因包括UDP-葡萄糖6-脱氢酶编码基因ugd，葡萄糖脱氢酶编码基因gcd和/或海藻糖-6-磷酸合酶编码基因otsA。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，利用质粒pRSFDuet-1、pCDFDuet-1或pACYCDuet-1游离表达了磷酸葡萄糖变位酶编码基因、UTP-葡萄糖-1-磷酸尿苷酸转移酶编码基因、金莲花来源的8位碳苷糖基转移酶TcCGT1和/或UDP尿苷激酶编码基因。

7.权利要求1或2所述的工程菌在制备糖基产物中的应用，其特征在于，所述应用为以黄酮或其他类黄酮为底物，在权利要求1或2所述工程菌的基础上，过表达金莲花来源的8位碳苷糖基转移酶TcCGT1得到重组菌株，再以重组菌株为发酵菌株进行糖基产物的发酵制备。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述黄酮或其他类黄酮包括木犀草素、芹菜素。

9.权利要求3或4所述的重组菌株在制备糖基产物中的应用，其特征在于，所述应用为以黄酮或其他类黄酮为底物，以权利要求所述的重组菌株为发酵菌株进行糖基产物的发酵制备。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述黄酮或其他类黄酮包括木犀草素、芹菜素。