[发明专利]一种茶树类黄酮糖基转移酶及其应用

说明书

本发明公开了一种茶树类黄酮糖基转移酶及其应用，涉及分子生物学领域和生物化学分析领域。所述类黄酮糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明基于代谢物与全基因组关联分析的方法，发现当茶树中糖基转移酶CsUGT708C的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示时，其具有高效催化多个类黄酮生成糖基化的代谢物的能力，同时对应在茶树体中芹菜素6,8‑二‑C‑内苷等糖苷化的代谢物含量较高。因此，可以根据茶树中糖基转移酶CsUGT708C的基因型进行茶树育种的前期筛选，从而有利于提高抗逆性茶树品种的选育效率。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域和生物化学分析领域，特别是涉及一种茶树类黄酮糖基转移酶及其应用。

背景技术

类黄酮的糖基化是茶树体中普遍存在的现象，这对于维持茶树体的细胞代谢平衡具有重要作用。UDP-糖基转移酶(UDP-glycosyl transferase，UGT)是糖基化酶的主成员之一，以尿苷二磷酸-糖(UDP-糖)作为糖基供体，转移到受体分子，以达到调节受体分子的水溶性、稳定性及生物活性。在茶树中类黄酮的糖基化与茶树抵御外界环境胁迫密切相关，糖基化黄酮类代谢物提高了溶解性、稳定性及其他生物活性，参与了茶树的抗寒冷、抗旱、抗盐碱等胁迫。茶树抗逆性的研究是茶树育种重要内容，因此解析类黄酮的糖基化的分子机制，加强对糖基转移酶基因的应用，对开发新的育种方法，提升育种效率具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种茶树类黄酮糖基转移酶及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，本发明基于代谢物与全基因组关联分析的方法，发现当茶树中糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示时，其具有高效催化多个类黄酮生成糖基化的代谢物的能力，因此，可以根据茶树中糖基转移酶的基因型进行茶树育种的前期筛选，从而有利于提高抗逆性茶树的育种效率。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供类黄酮糖基转移酶，所述类黄酮糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ IDNO.3所示。

本发明还提供上述的分子标记在茶树育种中的应用。

进一步地，所述应用为筛选类黄酮的糖基化水平高的茶树种质。

本发明还提供一种筛选类黄酮的糖基化水平高的茶树种质的方法，包括以下步骤：

(1)以茶树的cDNA为模板，采用SEQ ID NO.1-2所示的引物对，进行PCR扩增，得到克隆基因；

(2)对所述克隆基因进行测序和蛋白翻译，当所述克隆基因翻译成的蛋白序列仅如SEQ ID NO.3所示时，所述茶树即为类黄酮的糖基化水平高的茶树种质。

进一步地，在步骤(1)中，所述PCR扩增的反应体系为所述PCR扩增的反应体系为：cDNA模板2μL，10×扩增缓冲液3μL，4种dNTP混合物0.6μL，正反向引物各0.6μL，Taq DNA聚合酶2.5μL，超纯水24μL。

进一步地，在步骤(1)中，所述PCR扩增的反应程序为：步骤1温度94℃，2min；步骤2温度94℃，25s；步骤3温度56℃，20s；步骤4温度72℃，35s；步骤5温度72℃5min，步骤2-4循环35次。

本发明还提供一种筛选类黄酮的糖基化水平高的茶树种质的试剂盒，包括SEQ IDNO.1-2所示的引物对。

本发明公开了以下技术效果：