[发明专利]PNPO基因在制备多发性骨髓瘤标志物中的应用

说明书

本发明属于生物与新医药技术领域，具体公开了一种多发性骨髓瘤新的诊疗标志物吡哆醇5’磷酸氧化酶(PNPO)及艾曲波帕、海曲波帕靶向PNPO治疗多发性骨髓瘤的应用。本发明在临床患者数据库中PNPO在多发性骨髓瘤患者中高表达与患者疾病进程及不良预后显著相关，通过实验发现PNPO促进多发性骨髓瘤细胞增殖及其通过外泌体分泌促进骨破坏的发生，同时利用分子对接及体内外实验发现艾曲波帕和海曲波帕可以诱导多发性骨髓瘤细胞发生凋亡。本发明首次揭示了PNPO在多发性骨髓瘤发生发展中的调控作用，为多发性骨髓瘤治疗提供新的作用靶点，同时首次发现艾曲波帕和海曲波帕在多发性骨髓瘤中的应用，为多发性骨髓瘤的治疗提供新的策略。

技术领域

本发明涉及生物与新医药技术领域，特别是涉及一种多发性骨髓瘤新的诊疗标志物PNPO的发现及其通过外泌体分泌促进破骨分化的应用，同时涉及艾曲波帕和海曲波帕在MM中靶向PNPO的治疗药物应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是一种起源于骨髓B淋巴细胞终末分化的浆细胞的恶性肿瘤，一般伴随大量单克隆免疫球蛋白的分泌，是世界上第二大常见的血液系统恶性肿瘤。MM患者的临床症状多样，最经典的四联症状为骨痛、贫血、血钙升高和肾功能不全，其余还伴随着肝脾肿大、淋巴结增生、发热等症状。

目前，临床上MM的治疗方案主要包括化疗、自体干细胞移植(Autologous StemCell Transplantation，ASCT)、嵌合抗原受体T细胞疗法(ChimericAntigen Receptor T-Cell Immunotherapy，CAR-T)等。尽管目前临床上治疗MM的疗法不断涌现，但是其患者中位生存期仅有6-7年，仍是一种不治之症。因此，为改善患者预后及生存状况，探索发现MM新的诊疗靶点显得尤为重要。

在骨髓中恶性浆细胞的异常增生常伴有骨髓微环境的改变，因此MM发生发展高度依赖于骨髓微环境，包括细胞外囊泡在内的不同因素的交流，这种交流维持MM细胞的生长、引发耐药性、促进骨溶解的发展。外泌体是骨髓微环境的重要组成部分，其直径30-150nm，呈杯盘状的双层膜结构，携带多种核酸和蛋白。目前对于骨髓瘤外泌体的研究大都集中在耐药，血管生成，促进破骨细胞分化等方面，均与肿瘤微环境密切相关。因此，外泌体在MM的发生发展过程中起着重要的作用。

本发明利用MM患者临床数据库分析筛选MM的潜在高危因子PNPO作为研究目标，通过体内动物实验、临床数据库、体外细胞实验三方面验证PNPO与MM发生发展之间的关系，阐明PNPO在多发性骨髓瘤发生发展中所扮演的角色，同时发现其通过外泌体分泌促进破骨细胞分化的机制，并基于分子对接筛选出艾曲波帕和海曲波帕作为潜在MM治疗药物进行研究。MM新的诊疗靶点及机制的深入研究将为其进一步治疗提供有力的理论依据及方案指导，并开发已上市药物新的用药适应症为其应用奠定理论基础。

发明内容

本发明的目的是提供吡哆醇5’磷酸氧化酶(Pyridoxine 5’-phosphate oxidase，PNPO)，PNPO(NM_018129.4，Q9NVS9)作为多发性骨髓瘤中新的诊疗标志物中的应用，阐明多发性骨髓瘤通过外泌体分泌PNPO促进破骨细胞分化。

PNPO蛋白或其编码基因的抑制剂在制备治疗多发性骨髓瘤的药物中的应用。

作为优选方案，所述的抑制剂选自以PNPO蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制PNPO蛋白表达或基因转录的药物化合物；或者siRNA、shRNA、dsRNA、微小RNA、长链非编码RNA、反义核酸；或能表达或形成所述siRNA、dsRNA、微小RNA、长链非编码RNA、反义核酸的DNA序列或构建物。

作为特别优选方案，所述的药物化合物包括艾曲波帕或海曲波帕新。

一种多发性骨髓瘤的试剂盒，包括PNPO蛋白或其编码基因。

结果显示：