[发明专利]TDP-43在制备诊断原发性肝癌的试剂盒中的应用

说明书

本发明提供了一种TDP‑43在制备诊断原发性肝癌的试剂盒中的应用，通过扩增TDP‑43上下游引物，检测TDP‑43基因的表达水平来诊断是否患原发性肝癌，所述TDP‑43表达上调，若健康人血清中的TDP‑43表达水平为1，原发性肝癌患者的TDP‑43表达水平大于2.5判定为阳性。本发明在临床上证明个体血清TDP‑43的变化对于HCC的诊断有较高的价值，本发明通过检测原发性肝癌的TDP‑43，检测简便、快速，本发明为临床早期诊断原发性肝癌提供一种新的诊断手段。

技术领域

本发明属于医学检测技术领域，尤其涉及一种TDP-43在制备诊断原发性肝癌的试剂盒中的应用。

背景技术

肝细胞癌是一种原发性肝脏恶性肿瘤，是全球第五大常见癌症，但其不良预后使其成为导致癌症死亡的第二大因，患者五年生存率小于10％，并且，全球肝癌发病率以每年3～9％的速度递增。大多数的肝癌病例是有乙肝病毒(HBV)或丙肝病毒(HCV)感染所导致的肝硬化的病史。其他情况，如酒精性肝炎、非酒精性脂肪肝、糖尿病和血色素沉着症也会导致肝癌的发生。对肝癌最有效的治疗是需要在早期发现疾病，早期发现的肝癌可以通过肝移植、手术切除或经皮射频消融治愈。因此，研究生物标志物早期发现对肝癌的病人治疗至关重要。

TDP-43是肌萎缩侧索硬化症(ALS)和额颞叶变性(FTLD)特征性tau-阴性和泛素化阳性包裹体的主要成分。作为一个RNA结合蛋白，TDP-43具有两个RNA识别序列(RRM1和RRM2)和C端类朊病毒结构域，其中RNA识别序列和富含UG序列的单链RNA有高度的结合力，C端类朊病毒结构域与大多数家族性ALS相关突变有关。TDP-43在正常情况下以核定位为主，但在病理情况时，比如在病变的大脑和脊髓中发现TDP-43主要在细胞质中异常聚集，这与几种不同的致病机制引起TDP-43蛋白变化所导致的。对于TDP-43在肿瘤细胞中的作用知之甚少。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种TDP-43在制备诊断原发性肝癌的试剂盒中的应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种TDP-43在制备诊断原发性肝癌的试剂盒中的应用。

本发明还提供了一种用于诊断原发性肝癌的引物，所述引物包括扩增TDP-43的上下游引物，所述扩增TDP-43的上下游引物的序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。

本发明还提供了一种用于诊断原发性肝癌的试剂盒，包括上述引物。

优选的，所述试剂盒还包括RNA提取试剂、反转录试剂、定量PCR试剂。

优选的，所述试剂盒还包括阴性对照，所述阴性对照为健康人的血清。

相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：

本发明提供了一种TDP-43在制备诊断原发性肝癌的试剂盒中的应用，通过扩增TDP-43上下游引物，检测TDP-43基因的表达水平来诊断是否患原发性肝癌，所述TDP-43表达上调，若健康人血清中的TDP-43表达水平为1，原发性肝癌患者的TDP-43表达水平大于2.5判定为阳性。本发明在临床上证明个体血清TDP-43的变化对于HCC的诊断有较高的价值，本发明通过检测原发性肝癌的TDP-43，检测简便、快速，本发明为临床早期诊断原发性肝癌提供一种新的诊断手段。

附图说明

图1为肝癌细胞系中TDP43的表达量，其中DRS为肝癌细胞系中的TDP43在总RNA中的RNA-seq结果，RT-qPCR为肝癌细胞系中TDP43的Q-PCR结果；