[发明专利]UGT1A1基因多位点扩增引物组、试剂盒及检测方法在审
| 申请号: | 202211694930.2 | 申请日: | 2022-12-28 |
| 公开(公告)号: | CN116004807A | 公开(公告)日: | 2023-04-25 |
| 发明(设计)人: | 李婷;葛毅媛;冯文华;陈燕兰;刘可欣;陈希文;赵爽 | 申请(专利权)人: | 广州凯普医药科技有限公司;济南凯普医学检验实验室有限公司;广东凯普生物科技股份有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 张均莹 |
| 地址: | 510000 广东省广州市黄埔区九*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | ugt1a1 基因 多位点 扩增 引物 试剂盒 检测 方法 | ||
1.一种UGT1A1基因多位点扩增引物组,其特征在于,包括如下引物组的混合物:
p.G71R引物组,包括:正向引物p.G71R-F,其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示;反向引物p.G71R-R,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
p.P229Q引物组,包括:正向引物p.P229Q-F,其核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示;反向引物p.P229Q-R,其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;
p.Y486D引物组,包括:正向引物p.Y486D-F,其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;反向引物p.Y486D-R,其核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示;
p.P364L引物组,包括:正向引物p.P364L-F,其核苷酸序列如SEQ IDNO.7所示;反向引物p.P364L-R,其核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示;
A(TA)7TAA引物组,包括:正向引物A(TA)7TAA-F,其核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示;反向引物A(TA)7TAA-R,其核苷酸序列如SEQ IDNO.10所示;和
UGT1A1*60引物组,包括:正向引物UGT1A1*60-F,其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示;反向引物UGT1A1*60-R,其核苷酸序列如SEQ IDNO.12所示。
2.根据权利要求1所述的UGT1A1基因多位点扩增引物组,其特征在于,所述的UGT1A1基因多位点扩增引物组的5’端或3’端结合标记物;
可选的,所述的UGT1A1基因多位点扩增引物组的5’端结合生物素。
3.一种UGT1A1基因多位点扩增试剂盒,其特征在于,包括权利要求1或2所述的UGT1A1基因多位点扩增引物组。
4.根据权利要求3所述的UGT1A1基因多位点扩增试剂盒,其特征在于,还包括PCR MIX和/或DNA聚合酶;
可选的,还包括PCR扩增体系,以30μL为计:
PCR MIX,包括:10×PCR buffer,3μL/1个反应;dNTP浓度为25mM,0.5μL/1个反应;MgCl2浓度为1M,0.1μL/1个反应;UGT1A1基因多位点扩增引物组,每个引物组各1μL,各引物的浓度10μM,正向引物和反向引物各加入体积0.5μL/1个反应;余量用纯水补足至27.5μL;
DNA聚合酶,酶活为5U/μL,加入体积为0.5μL/1个反应;
DNA模板,加入体积为2μL/1个反应。
5.一种UGT1A1基因多位点突变检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求1或2所述的UGT1A1基因多位点扩增引物组或权利要求3或4所述的UGT1A1基因多位点扩增试剂盒。
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