[发明专利]一种用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合及其应用在审
| 申请号: | 202211666754.1 | 申请日: | 2022-12-23 |
| 公开(公告)号: | CN116287442A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
| 发明(设计)人: | 杨文文;林灵;楼敬伟;吴守信;陶维维;汪帅男;王博伟;何顺清;汪梦竹;吕芳;何小明 | 申请(专利权)人: | 上海宝藤生物医药科技股份有限公司;上海华藤生物科技有限公司;上海宝藤医学检验所有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 刘二艳 |
| 地址: | 201203 上海市浦东新区中国*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 检测 乳头 病毒 引物 探针 组合 及其 应用 | ||
1.一种用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合,其特征在于,所述引物探针组合包括检测人乳头瘤病毒引物和探针;
所述引物的核酸序列包括SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列;
所述探针选自核酸序列包括SEQ ID NO.3~SEQ ID NO.25所示的探针中的任意一种或至少两种的组合。
2.根据权利要求1所述的用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合,其特征在于,所述引物探针组合还包括内参基因的引物和探针;
优选地,所述内参基因包括RNaseP基因;
优选地,所述内参基因的引物的核酸序列包括SEQ ID NO.26和SEQ ID NO.27所示的序列;
优选地,所述内参基因的探针的核酸序列包括SEQ ID NO.28所示的序列。
3.根据权利要求1或2所述的用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合,其特征在于,所述探针的5’端修饰有荧光基团,3’端修饰有淬灭基团;
优选地,所述荧光基团包括FAM、HEX、VIC、ROX、TAMRA、JOE、TET、CY3、CY5、TexasRed或LCRED460中的任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述淬灭基团包括TAMRA、BHQ1、BHQ2、MGB、DABCYL、BHQ3或TAMRA中任意一种或至少两种的组合。
4.权利要求1-3任一项所述的用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合在制备检测人乳头瘤病毒的产品中的应用。
5.一种检测人乳头瘤病毒的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1-3任一项所述的用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合。
6.根据权利要求5所述的检测人乳头瘤病毒的试剂盒,其特征在于,所试剂盒还包括荧光PCR试剂。
7.权利要求1-3任一项所述的用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合在检测人乳头瘤病毒中的应用。
8.一种以非疾病诊断为目的的检测人乳头瘤病毒的方法,其特征在于,所述方法包括:
以待测样本中核酸为模板,利用权利要求1-3任一项所述的用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合进行荧光PCR,对荧光PCR产物进行熔解曲线分析,判断人乳头瘤病毒分型。
9.根据权利要求8所述的以非疾病诊断为目的的检测人乳头瘤病毒的方法,其特征在于,所述荧光PCR的条件为:(1)93~96℃预变性3~6min;(2)93~96℃、8~12s,58~62℃、25~35s,进行40~45个循环;
优选地,所述熔解曲线分析的条件为:(1)93~96℃、1~3min;(2)43~46℃、110~130s;(3)以1%速率升温至93~96℃。
10.一种检测人乳头瘤病毒的装置,其特征在于,所述装置包括扩增单元和熔解曲线分析单元;
所述扩增单元用于执行包括:
以待测样本中核酸为模板,权利要求1-3任一项所述的用于检测人乳头瘤病毒的引物探针组合进行荧光PCR;
所述熔解曲线分析单元用于执行包括:
对所述扩增单元的荧光PCR产物进行熔解曲线分析,判断人乳头瘤病毒分型。
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