[发明专利]一种香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA及其前体与应用

说明书

本发明公开了一种香蕉枯萎病菌致病菌致病性相关milRNA及其前体与应用。所述milRNA及其前体的序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。本发明使用Split‑marker基因敲除技术，通过同源重组将foc‑milR‑1前体从香蕉枯萎病菌中敲除，获得的基因缺失突变体的致病力显著降低。本发明有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病机制，为杀菌剂的设计提供了基因靶标，也为植物病害防治提供了新的思路。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种香蕉枯萎病菌致病菌致病性相关milRNA及其前体与应用。

背景技术

香蕉(Musa spp.)主要种植在热带地区，是一种重要的水果，也是继水稻、小麦、玉米之后的第四大粮食作物，但是香蕉种植业的发展受到香蕉枯萎病的严重影响。香蕉枯萎病由香蕉枯萎病菌——尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense，Foc)引起，分为4个生理小种，其中4号生理小种Foc4几乎能侵染所有的香蕉品种，致病性最强，危害性最广。目前对香蕉枯萎病的防治主要集中在两个方向上。一是采用化学药剂或者生物防治，防治效果并不理想；二是培育抗病香蕉品种，但随着病原菌的进化，抗病性逐渐丧失。明确香蕉枯萎病的致病分子机理有助于开发防治香蕉枯萎病菌的新策略。

microRNA(miRNA)是一种短链的核酸RNA，通过采用翻译抑制或者利用自身与生物基因结合产生靶向降解来调节转录后水平的基因表达，近年来在动植物体内被广泛发现。在真菌中发现的小分子RNA与动植物中存在的miRNA既具有相似性，又有所不同，称其为microRNA-like RNA(milRNA)。目前已经有大量研究关注到miRNA在植物-致病菌互作间发挥的作用，但香蕉与Foc4互作之间miRNA的研究主要聚焦在为响应Foc4侵染，香蕉根系miRNA的变化。2022年香蕉枯萎病菌中milR-87被报道在致病性中发挥作用，此外鲜有研究针对尖孢镰刀菌中的小分子RNA。

发明内容

本发明的目的之一在于克服现有技术的缺点与不足，提供了一种香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA。

本发明的另一目的在于提供上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体。

本发明的再一目的在于提供上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA及其前体的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA，命名为foc-milR-1，其核酸序列如下所示：TGGATGGATGCGTG。

上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA的前体，其核酸序列如下所示：

AGGGCTTGTCACCATGGTTTCTTTTGTTAATTTTCATTTGTCTGTTTCCTTTTGGCAT GAGCATTCCTTCATGTCTTGCGTTGTGGTGGTGAGACGGATATGGATGTATGGATGGATG GATGGATGGATGCGTGAGGTGGAAATCAGCGAGCAGG。

上述香蕉枯萎病致病菌致病性相关milRNA或其前体作为靶点在如下情况之一中的应用：

(1)在调控香蕉枯萎病致病菌致病性中的应用；

(2)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝形态中的应用；

(3)在调控香蕉枯萎病致病菌菌丝生长中的应用；

(4)在调控香蕉枯萎病致病菌产孢量中的应用；

(5)在制备抗香蕉枯萎病致病菌的杀菌剂中的应用；

(6)在防治由香蕉枯萎病致病菌引起的植物病害中的应用。