[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌二联灭活疫苗的检测工艺

说明书

本申请涉及一种猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌二联灭活疫苗的检测工艺，属于疫苗检测技术领域，通过在检测前对选取的小猪进行表面以及口腔的清洗消毒，能够去除小猪表面以及口腔中的细菌和病毒，从而能够减少外界细菌和病毒对检测结果的影响，进而能够提高检测结果的准确性；通过清洗消毒后对小猪饲养，再进行粪便、血液以及肠道的检测，能够确保挑选的用于检测的小猪为健康的小猪，从而减少小猪自身携带流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌对检测结果的影响，进一步提高了检测结果的准确性。

技术领域

本发明涉及一种猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌二联灭活疫苗的检测工艺，属于疫苗检测技术领域。

背景技术

猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒感染引起的一种急性、高度接触性的猪肠道传染病，可感染各年龄的猪，导致动物出现呕吐、水样腹泻及脱水等临床症状，以仔猪的感染最为严重，病死率可达80％-100％，给养猪业造成了巨大的经济损失；

致病性大肠杆菌分为侵入型和毒素型两类，前者引起的腹泻与痢疾杆菌引起的痢疾相似，一般称为急性痢疾型；后者所引起的腹泻为胃肠炎型，一般称为急性胃肠炎型，致病性大肠杆菌以及猪流行性腹泻病毒都会引起猪的腹泻，导致猪的死亡；

中国发明专利：CN202110043464.0，所公开的“猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌二联灭活疫苗的研制方法”，其说明书公开：疫苗的效力试验，2.1.材料与方法：用产前30～45日龄妊娠母猪10头，随机分成2组，每组5头；第1组颈部肌肉注射二联灭活疫苗2ml/头，产前20日加强免疫1次，2ml/头，作为免疫组；第2组作为对照组....；上述专利在对疫苗进行检测前的选猪环节，缺乏对猪的检测以及处理，由于猪舍内环境存在细菌和病毒，这些选取的猪存在已经感染病毒和细菌的情况，进而影响检测结果的准确性。

因此我们对此做出改进，提出一种猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌二联灭活疫苗的检测工艺。

发明内容

(一)本发明要解决的技术问题是：选猪环节缺乏对猪的检测以及处理，选取的猪存在已经感染病毒和细菌的情况，进而影响检测结果准确性的问题。

(二)技术方案

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌二联灭活疫苗的检测工艺，包括：

S1、检测前的准备，取40-45日龄小猪30只，对小猪表面以及口腔进行清洗消毒，消毒后的小猪置于消毒后的猪舍中饲养36小时；

S2、采集猪粪便以及血液进行检测，并对小猪进行肠镜检测，确认小猪是否带有猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌，且确认小猪肠道内是否发生病变，选取不带猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌的小猪20只，随机等分为四组，四组小猪分别编号为一、二、三以及四；

S3、一号组小猪注射猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌二联灭活疫苗，二号组小猪注射猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌，三号组注射猪流行性腹泻病毒，四号组注射致病性大肠杆菌，饲养并采集粪便、血液以及肠道镜检；

S4、向一号组小猪注射猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌，二号组、三号组以及四号组均注射猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌二联灭活疫苗，饲养并采集粪便、血液以及肠道镜检。

其中，S1中对猪的口腔清洗消毒的步骤为：

先用清水冲洗猪口腔中的残留物，再用0.15％的高锰酸钾溶液冲洗猪的口腔进行消毒。

其中，S1中对猪表面的清洗消毒的步骤为：

先用清水冲洗掉猪表面可见的污渍，然后使用刷子和清洁剂对猪的表面进行刷洗，然后将刷洗后的猪浸泡于0.15％的高锰酸钾溶液中，浸泡时间为5-10分钟。

其中，S1中猪清洗消毒后饲养的温度为24度，湿度为70％。