[发明专利]一种多肽毒素与化学农药的组合制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种多肽毒素与化学农药的组合制剂及其制备方法和应用，所述组合制剂包括拟环纹豹蛛毒素PPTX‑22和氯虫苯甲酰胺，所述拟环纹豹蛛毒素PPTX‑22其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过分析作用于昆虫钠离子通道的蜘蛛毒素PPTX‑22与拟除虫菊酯杀虫剂氯虫苯甲酰胺作用机制的异同点，并测试蜘蛛毒素与菊酯类杀虫剂联合作用的机制发现，毒素PPTX‑22的作用位点特异，与氯虫苯甲酰胺协同调控昆虫钠离子通道，在靶标层面形成增效，并据此获得了对农业害虫增效的毒素‑杀虫剂组合制剂。

技术领域

本发明属于害虫防治，具体涉及一种多肽毒素与化学农药的组合制剂及其制备方法和应用。

背景技术

蜘蛛毒素是优秀的杀虫资源，具有良好的杀虫活性和很强的选择毒力。目前作用于昆虫鱼尼丁受体(Ryanodine receptor)的蜘蛛毒素尚未见报道。鱼尼丁受体因其与鱼尼丁高度亲和而得名是控制细胞内Ca²⁺释放的配体门控钙离子通道，主要位于肌肉细胞的肌质网和神经细胞的内质网上。以氯虫苯甲酰胺为代表的双酰胺类杀虫剂是昆虫鱼尼丁受体的变构调节剂，通过作用于靶标昆虫肌肉细胞的四聚体鱼尼丁受体，使受体变构与之结合而打开钙离子通道，细胞内的钙离子通过肌浆/内质网膜快速进入细胞质，引起害虫的肌肉持续收缩，继而出现麻痹和昏睡症状，并立即停食而最终死亡。自1998年第一个双酰胺类杀虫剂氟苯虫酰胺上市以来，该类杀虫剂以其独特的构效关系引起了广泛的研究兴趣，至今已先后有8个品种上市。尽管这类药剂中的氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺表现出对鳞翅目害虫优异的杀虫活性，但其抗药性问题也逐渐显现。2008年，菲律宾和泰国相继报道了小菜蛾对氯虫苯甲酰胺产生了775倍的抗性。

目前，在全球不同国家和地区，至少有9种鳞翅目害虫对氟苯虫酰胺或氯虫苯甲酰胺产生了不同水平的抗性。抗药性的产生严重威胁着氯虫苯甲酰胺等双酰胺类杀虫剂的使用寿命。而杀虫剂复配在提高害虫防治效果、延缓害虫抗药性方面具有投资少、收效快的优势。杀虫剂复配通常是将不同类型、不同作用方式的两种或两种以上的杀虫剂按照一定比例混合，以达到扩大防治范围、增强杀虫活性、提高防治效果、延缓和治理有害生物抗药性的目的。在鳞翅目害虫防治中的复配药剂，考虑到杀虫剂单剂的作用机制之间的差异性和互补性，主要包括有机磷与拟除虫菊酯两类杀虫剂之间的复配、有机磷与新烟碱两类杀虫剂之间的复配、双酰胺类与大环内酯两类杀虫剂之间的复配、双酰胺类与新烟碱两类杀虫剂之间的复配等，其他类型的复配仅有零星报道。对于生物大分子杀虫成分的研究，主要集中在单体杀虫活性、杀虫机制与应用示范等方面，还未见多肽类毒素与化学杀虫剂的复配测试与应用的报道。同时，由于需要避免作用于同一靶标的两个杀虫剂在靶标突变抗药性发展中的负面影响，因此还未见作用于同一靶标不同位点的杀虫剂复配方式。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明提供一种多肽毒素与化学农药的组合制剂，其主要成份是拟环纹豹蛛毒素PPTX-22和氯虫苯甲酰胺。本发明提供的复配杀虫剂为多肽类毒素与化学杀虫剂的组合，可以高效用于主要农业害虫和卫生害虫的防治，解决害虫对化学杀虫剂抗药性发展迅速、化学杀虫剂过量使用、单一有效成分杀虫活性低等害虫防治中的问题。

本发明还提供所述组合制剂的制备方法和应用。

技术方案：为了实现上述目的，本发明所述的一种组合制剂，所述毒素生物制剂包括拟环纹豹蛛毒素PPTX-22和氯虫苯甲酰胺，所述拟环纹豹蛛毒素PPTX-22为一种成熟肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

其中，所述拟环纹豹蛛毒素PPTX-22和氯虫苯甲酰胺的摩尔比为1:5-5:1。

作为优选，所述拟环纹豹蛛毒素PPTX-22和氯虫苯甲酰胺的摩尔比为1:5、1:3或者3:1。

本发明所述的组合制剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)制备拟环纹豹蛛毒素PPTX-22；