[发明专利]一种抗菌肽及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种抗菌肽及其制备方法与应用，所述抗菌肽为抗菌肽AC‑1，其氨基酸序列为：F₁F₂L₃K₄F₅L₆N₇S₈F₉G₁₀K₁₁V₁₂V₁₃K₁₄A₁₅I₁₆G₁₇V₁₈A₁₉P₂₀；抗菌肽AC‑1可特异性的对于白色念珠菌具有良好的抑菌作用，最小抑菌浓度低至7.8μg/ml，而不影响其他菌株的生长；该类抗菌肽有作为抗白色念珠菌药物的强大潜力。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗菌肽及其制备方法与应用。

背景技术

近年来，由于细菌的进化和抗生素的滥用，多重耐药细菌不断增长，导致临床抗感染治疗难度增加，越来越多的患者因为找不到合适的抗菌药而相继死亡，并成为全球第二大死亡原因，给一线临床医生造成巨大困扰与挑战。现有抗生素治疗已然不能满足临床治疗的需求，因此迫切需要寻找新的替代药物或治疗策略。

目前，侵入性念珠菌病严重威胁人类的健康，而白色念珠菌(Candida albicans)是引起该类疾病最为常见的一类病原性微生物。该病原菌是一种条件性致病真菌，常寄生于人体皮肤、口腔、上呼吸道、肠道、阴道黏膜等，临床上常见的是口腔念珠菌病和念珠菌性阴道炎。当前临床针对白色念珠菌的药物有多烯类(如两性霉素B)、唑类(如氟康唑、伏立康唑等)、棘白菌素类(如卡泊芬净、米卡芬净等)、嘧啶类似物(如5-氟胞嘧啶等)、丙酰胺类(如特比萘芬等)。随着多重耐药白色念珠菌株的不断出现，开发新型抗真菌药物已迫在眉睫。而抗菌肽(antimicrobial peptide)药物作为一类有着低毒性、活性高、合成效率高、副作用小、不易产生耐药性等众多优点的新型药物受到了越来越多的关注。

现有的抗菌肽大部分具有广谱的抗菌效果，在临床应用时越容易引发负效应，如损害口腔及肠道菌群的种类。

鉴于此，申请此专利。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种抗菌肽及其应用，本发明筛选到一种抗菌肽AC-1，可特异性的抑制白色念珠菌的生长，而不影响其他菌株的生长。

本发明的目的是提供一种抗菌肽的制备方法。

本发明的另一目的是提供上述制备方法得到的抗菌肽。

本发明的再一目的是提供上述抗菌肽AC-1的应用。

根据本发明的具体实施方式的抗菌肽的制备方法，所述制备方法为：将收集到大鲵的皮肤分泌液用乙酸浸提20-28h；离心收集上清，用磷酸盐缓冲液调pH至7.2，离心，取上清液进行冷冻干燥，得到粗提物；将所述粗提物用灭菌蒸馏水溶解，超滤并截留分子量小于5000Da的滤液，然后筛选出具有抗菌活性的溶液，经纯化后得到抗菌肽。

根据本发明的具体实施方式的抗菌肽，所述抗菌肽为抗菌肽AC-1，所述抗菌肽AC-1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示：F1F2L3K4F5L6N7S8F9G10K11V12V13K14A15I16G17V18A19P20。(关键氨基酸位点为第3位，第8位，第9位，第10位，第11位，第14位,第16位)

所述的抗菌肽非关键位点氨基酸突变后的系列多肽，所述抗菌肽为抗菌肽AC-263，所述抗菌肽AC-263的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述抗菌肽为抗菌肽AC-265，所述抗菌肽AC-265的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述抗菌肽为抗菌肽AC-278，所述抗菌肽AC-278的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。