[发明专利]一种利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法

权利要求书

1.一种利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、取破壁松花粉溶于柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液中，搅拌均匀；

步骤二、将松花粉培养基进行巴氏杀菌，沸水浴加热至中心温度达到80-90℃，置于80-90℃水浴中保温20-40min，保温时间到后立即冰水降温至室温；

步骤三、用Na₂HPO₄溶液和松花粉培养基混匀，调节pH；

步骤四、从活化好的菌悬液中接种米根霉菌，在20-40℃、150-250r/min条件下，摇瓶发酵3-5天；

步骤五、发酵结束后，以3500-5500rpm离心10-20min，固液分离；所得固体用体积浓度为70％乙醇在40-50℃下超声搅拌提取2-3h，重复提取三次，合并滤液，冻干，得到提取物。

2.根据权利要求1所述的利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，所述柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液的浓度为0.1mol/L，PH为4.3。

3.根据权利要求2所述的利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，所述Na₂HPO₄溶液的浓度为0.2mol/L。

4.根据权利要求1所述的利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，在所述步骤五中，所述所得固体与体积浓度为70％乙醇的质量比为1:(15-25)。

5.根据权利要求1所述的利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，所述米根霉菌为3010米根霉菌。

6.根据权利要求1所述的利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，所述破壁后松花粉与(柠檬酸缓冲液+Na₂HPO₄溶液)的重量比为1:(15-25)。

7.根据权利要求2所述的利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，所述Na₂HPO₄溶液调节的pH为6.2-6.8。

8.根据权利要求1所述的利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，所述活化好的菌悬液的孢子数为10⁶个/mL。

9.根据权利要求1所述的利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，其特征在于，所述步骤四中米根霉菌的接菌量为10％(V/V)。