[发明专利]血液外泌体分子标志物及其在制备肝癌诊断产品中的应用

说明书

本发明属于分子诊断技术领域，具体涉及外泌体mRNA作为诊断肝细胞癌的分子标志物及其应用。本发明所述外泌体mRNA为HMMR与B4GALT2。血液Exo‑HMMR和Exo‑B4GALT2是新型生物标志物，二者构成的风险评分RiskScore，较准确地区分肝细胞癌受试者与非肝细胞癌受试者（包括乙型肝炎患者、肝硬化、正常人等），将大大提高肝细胞癌早期诊断的灵敏度、特异度和准确性，从而避免临床上不必要的穿刺活检，该生物标志物的开发有助于肝细胞癌的预后预警，并为其他肿瘤类似生物标志物的研制提供借鉴。

技术领域

本发明属于分子诊断技术领域，具体涉及外泌体mRNA作为肝细胞癌的分子标志物及其应用。

背景技术

肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率高，近年来呈上升趋势，使人类健康处于危险之中。现有的预后预测模型(例如，Okuda，TNM，BCLC，JI，CUPI，CLIP，GRETCH，CIS)主要基于肿瘤的临床病理学特征，但它们只能提供模糊的预后预测能力，开发基于分子生物标志物的有效工具至关重要，用于筛查肝癌患者，并指导治疗。

糖酵解速率的增加以及随后产生的乳酸的积累是HCC细胞中代谢异常的标志之一。Otto Warburg等人在1920年提出，暴露于缺氧甚至有氧环境的肿瘤细胞主要依靠糖酵解获得能量，这被称为Warburg效应或有氧糖酵解。根据大量研究，已知恶性肿瘤细胞具有增加的葡萄糖摄取能力，糖酵解相关基因的活性表达和相对高的酶活性。因为糖酵解为肿瘤细胞提供了大量能量，所以增加糖酵解与增加肿瘤侵袭和增殖有关并不奇怪。这表明基于肝癌细胞代谢的临床诊断模型可能是有用的。我们希望研究整套糖酵解调节因子和信号通路分子，以及糖酵解与肝癌发展之间的联系，并开发基于糖酵解相关分子的诊断模型。

外泌体是具有直径为50-150nm的杯状磷脂双层膜结构的细胞外囊泡，通过运输细胞内mRNA、miRNA、lncRNA和蛋白质促进细胞间通讯。外泌体在肿瘤侵袭和转移中起重要作用，这意味着外泌体可用于肿瘤的诊断和治疗。外泌体可以从亲代细胞中携带重要的分子和遗传信息，使其成为观察和分析亲代肿瘤细胞进行临床诊断的理想工具，无需进行侵入性组织活检。因此，外泌体可以通过充当液相活检的窗口来为肿瘤提供代谢相关的循环源信息。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是提供了一种用于肝癌诊断的生物分子标志物。

本发明还要解决的技术问题是提供了一种扩增所述的生物分子标志物的引物对。

本发明还要解决的技术问题是提供了所述的生物分子标志物、所述的引物对在制备肝癌诊断产品或肝癌预后评估产品的无创诊断产品中的应用。

本发明最后要解决的技术问题是提供了一种诊断肝癌或用于肝癌预后评估的诊断试剂盒。

技术方案：为了解决上述技术问题，本发明提供了一种用于肝癌诊断的生物分子标志物，所述生物分子标志物为血浆外泌体mRNA，所述血浆外泌体mRNA包括HMMR和B4GALT2。

其中，所述HMMR的genbank登录号为Gene ID:3161，所述B4GALT2的genbank登录号为Gene ID:8704。

本发明内容还包括扩增或检测所述的生物分子标志物的引物对，扩增或检测HMMR的引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，扩增或检测B4GALT2的引物对的序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。

本发明内容还包括所述的生物分子标志物、所述的引物对在制备肝癌诊断产品中的应用。

本发明内容还包括所述的所述的生物分子标志物、所述的引物对在制备肝癌预后评估产品的无创诊断产品中的应用。