[发明专利]28个短串联重复序列的复合扩增体系、试剂盒及应用在审
| 申请号: | 202211163232.X | 申请日: | 2022-09-23 |
| 公开(公告)号: | CN115948568A | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
| 发明(设计)人: | 惠娜;赵晶;高知枭;于在亮;陈初光 | 申请(专利权)人: | 苏州阅微基因技术有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 刘妍妍 |
| 地址: | 215011 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 28 串联 重复 序列 复合 扩增 体系 试剂盒 应用 | ||
1.28个短串联重复序列的复合扩增体系,其特征在于,所述复合扩增体系包括28对引物,可同时扩增28个位点:A6-1、A6-2、A6-3、A6-4、A7-1、A7-2、A7-3、A7-4、A11-1、A11-2、A11-3、A11-4、A14-1、A14-2、A14-3、A14-4、A15-1、A15-2、A15-3、A15-4、A20-01、A20-2、A20-3、A20-4、A20-5、A20-6、A20-7、A20-8;
所述的28对引物分别为:
2.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,各引物浓度为:
3.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,所述复合扩增体系中的被扩增位点分别由五种颜色的荧光标记,相同荧光标记视为同一组,五组组合分别为:
第一组:A6-1、A6-2、A6-3、A6-4、A7-1;
第二组:A7-2、A7-3、A7-4、A11-1、A11-2、A11-3、A11-4;
第三组:A14-1、A14-2、A14-3、A14-4、A15-1;
第四组:A15-2、A15-3、A15-4、A20-1、A20-2;
第五组:A20-3、A20-4、A20-5、A20-6、A20-7、A20-8。
4.根据权利要求3所述的复合扩增体系,其特征在于,第一组的标记为FAM标记,第二组的标记为HEX标记,第三组的标记为TAMRA标记,第四组的标记为ROX标记,第五组的标记为PURP标记。
5.根据权利要求1或2所述的复合扩增体系,其特征在于,所述扩增体系还包括PCRMaster Mix和DNA模板。
6.根据权利要求5所述的复合扩增体系,其特征在于,所述PCR Master Mix包括:10mM的硫酸铵,10mM的氯化钾,60mM的pH 8.3的Tris-HCl,2.5mM的镁离子,0.9ug/ul的BSA,5%的DMSO,8%的乙二醇,1mM的Na4P2O7和0.25mM的Dntp,以及2U的Taq酶。
7.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,DNA样品来源于人的血液、羊水或流产组织。
8.根据权利要求1所述的复合扩增体系,其特征在于,所述扩增体系扩增时的反应条件为:
第1步:95℃变性5分钟,第2步:94℃变性20秒,第3步60℃退火2分钟,重复2至3步30次,最后72℃延伸10分钟。
9.一种试剂盒,包括权利要求1-8任一项所述的复合扩增体系。
10.权利要求1-8任一项所述的扩增体系或权利要求8所述的试剂盒在提示单亲二体中的应用。
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