[发明专利]一种在马克斯克鲁维酵母菌株中表达外源基因的重组载体

权利要求书

1.一种载体，其特征在于，含有顺序连接的如下片段：NC1启动子、CYC终止子、复制子、抗性基因、营养基因A；

所述NC1启动子的序列如SEQ ID NO.2所示；

所述CYC终止子的序列如SEQ ID NO.4所示；

所述营养基因A的序列如SEQ ID NO.5所示；

所述复制子的序列如SEQ ID NO.7所示；

营养基因A和NC1启动子之间连接有SEQ ID NO.8所示序列；

其中，复制子、抗性基因、营养基因A反向连接。

2.如权利要求1所述的载体，其特征在于，所述抗性基因是氨苄霉素抗性基因、卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因或氯霉素抗性基因，优选为氨苄霉素抗性基因，序列如SEQ IDNO.6所示。

3.如权利要求1所述的载体，其特征在于，所述NC1启动子和CYC终止子之间连接有SEQID NO.9所示序列；

和/或所述CYC终止子和复制子之间连接有SEQ ID NO.10所示序列；

和/或所述复制子和抗性基因之间连接有SEQ ID NO.11所示序列；

和/或所述抗性基因和营养基因A之间连接有SEQ ID NO.12所示序列；

优选地，所述重组载体的序列如SEQ ID NO.13所示。

4.权利要求1～3任一项所述的载体在马克斯克鲁维酵母菌中表达外源基因的应用，优选的，所述外源基因是氧化酶基因A。

5.一种重组载体，其特征在于，它是含有目标基因的权利要求1～3任一项所述的载体。

6.如权利要求5所述的重组载体，其特征在于，所述目标基因是氧化酶基因A，所述重组载体含有顺序连接的如下片段：NC1启动子、氧化酶基因A、CYC终止子、复制子、抗性基因、营养基因A；所述氧化酶基因A的序列如SEQ ID NO.3所示。

7.如权利要求6所述的重组载体，其特征在于，所述氧化酶基因A和CYC终止子之间连接有SEQ ID NO.9所示序列；

优选地，所述重组载体的序列如SEQ ID NO.1所示。

8.权利要求5～7任一项所述的重组载体在制备重组马克斯克鲁维酵母菌中的应用；优选地，所述马克斯克鲁维酵母菌是URA3营养缺陷型马克斯克鲁维酵母菌。

9.一种重组菌，其特征在于，它是包含权利要求5～7任一项所述的重组载体的马克斯克鲁维酵母菌；优选地，所述马克斯克鲁维酵母菌是URA3营养缺陷型马克斯克鲁维酵母菌。

10.权利要求9所述的重组菌在制备氧化酶A蛋白中的用途。