[发明专利]一种检测双链DNA错配类型及位置的方法

权利要求书

1.一种检测双链DNA错配类型及位置的方法，其特征在于，其包括如下步骤：将双链DNA样品以及可与特定类型碱基错配位点选择性结合的配体结合后，通过α-溶血素纳米孔检测平台检测所述双链DNA样品与所述配体结合前后的热稳定性差异指标，得到所述双链DNA的错配碱基类型与位置信息。

2.根据权利要求1所述的检测双链DNA错配类型及位置的方法，其特征在于，所述特定类型碱基错配位点包括G-G、G-T、G-A、C-C、A-A、T-T、C-A、C-T或T-C。

3.根据权利要求1所述的一种检测双链DNA错配类型及位置的方法，其特征在于，所述特定类型碱基错配位点为G-G时，所述配体为2-氨基-1,8-萘啶二聚体。

4.根据权利要求1所述的检测双链DNA错配类型及位置的方法，其特征在于，所述热稳定性差异指标为所述双链DNA通过所述α-溶血素纳米孔时的解旋时间。

5.根据权利要求4所述的检测双链DNA错配类型及位置的方法，其特征在于，所述解旋时间包括每个易位事件的停留时间和/或阻断电流。

6.根据权利要求1所述的检测双链DNA错配类型及位置的方法，其特征在于，所述α-溶血素纳米孔的制备方法包括以下步骤：

将溶解在癸烷中的二苯基磷脂酰胆碱加入双层室中，在孔口处注入电解质溶液，通过DPhPC形成平面脂质双层膜，将α-HL蛋白添加到cis腔中，cis腔连接到“地”，通过两个Ag/AgCl电极，在两个腔室之间施加200mV的电压，待蛋白质运动至插入到磷脂双分子层中制得。

7.根据权利要求1所述的检测双链DNA错配类型及位置的方法，其特征在于，所述热稳定性差异指标的检测方法包括以下步骤：

将双链DNA或其与配体的混合物添加到cis室，用膜片钳放大器记录电流的变化，得到易位信号峰的数据，将易位信号的持续时间规律进行统计，得到双链DNA的错配碱基与位置信息。