[发明专利]婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒及筛选方法

说明书

本发明公开了一种婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒，是由以下各组分组成：试剂盒主体A：固定液，多聚甲醛溶液；检测试剂B：染色液，苏丹黑染液；辅助试剂C：麻醉剂，三卡因溶液；辅助试剂D：PBST溶液，现配现用；辅助试剂E：脱色液，4℃储存。本发明能够实现婴童日用化学品炎症舒缓功效的快速识别，较目前常用的检测方法可降低试剂干扰引起的假阳性，对于炎症舒缓功效筛选的专一性更好，具有普遍的适用性特点，可应用于功效原料筛选和产品功效评价环节。

技术领域

本发明属于日用化学品炎症舒缓功效筛选的技术领域，具体涉及一种婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒及筛选方法。

背景技术

市场上许多婴童化妆品宣称具有炎症舒缓功效，目前对于炎症舒缓功效的筛选主要包括体外实验和在体试验。

体外实验方法包括物理化学法、生物化学法、细胞生物学法、三维重组皮肤模型替代法等。物理化学法是通过检测化妆品的物理性能和特定化学成分含量来评价其效果的便捷手段，目前在化妆品炎症舒缓功效评价方面多为特定功效成分的定性定量检测。生物化学法是借助光谱分析、电子显微镜以及其他物理、化学技术手段，对影响功效的特征指标(如自由基)、重要生物分子(如蛋白质等)含量进行测试分析的一种方法。在抗炎抗敏的功效评价中常用的生物化学实验有透明质酸酶抑制实验及自由基清除实验等，也有部分研究人员使用红细胞溶血试验。细胞生物学是研究细胞结构、功能及其生命规律的一门科学。细胞生物学法通过建立细胞模型，在体外模拟人体生理环境来培养细胞，测量细胞接触受试物前后的变化来验证原料的功效性。目前，皮肤屏障结构相关蛋白尚未被广泛地分析与研究，但已逐渐引起了生物医药学界的重视。近年来出现了针对在外界活性物质刺激下对角质细胞中AQP－3(Aquaporin－3，水通道蛋白－3)，FLG(Filag-grin，丝聚蛋白)和Caspase－14(半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶－14)等表达量影响的研究。三维重组皮肤模型替代法是利用组织工程技术，将人源皮肤细胞培养于特殊的插入式培养皿上构建的具有三维结构的人工皮肤组织模型，用其替代动物模型进行实验的一种方法。三维重组皮肤模型为化妆品安全性、功效性评价提供了新的技术手段。

在体实验主要包括动物实验法和人体实验法。动物实验法是目前应用最为广泛的抗敏功效评价方法，目前已有使用动物作为受试对象，在进行斑贴激发后，由实验者根据动物皮肤受损情况打分评价样品的抗敏效果。除斑贴激发实验外，多为抑制炎症和过敏反应实验，但这方面的研究不仅限于皮肤，还涉及到对机体免疫系统的影响。相关的实验观测指标包括病理组织学观察，各种免疫因子水平的测定及相关基因的表达分析，以及嗜酸性粒细胞、白细胞和肥大细胞的活性检测等。在大部分抗敏功效化妆品原料及产品的开发环节中，人体实验是必不可少的一部分。主要包括主观评价法、半主观评价法及客观评价法。

然而上述现有的评价方法都存在一定的局限性：体外实验存在实验周期长、成本高、不能进行高通量的筛选；动物实验对动物伤害大，实验复杂等问题；人体试验存在实验产品安全以及评价人主观性强等问题。因此急需一种用于婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒。

本发明的另一个目的是提供一种婴童日用化学品炎症舒缓功效的筛选方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的第一方面提供了一种婴童日用化学品炎症舒缓功效筛选方法用试剂盒，是由以下各组分组成：

试剂盒主体A：固定液，多聚甲醛溶液，用于斑马鱼幼鱼固定，4℃储存；

检测试剂B：染色液，苏丹黑染液，用于中性粒细胞染色，4℃储存；

辅助试剂C：麻醉剂，三卡因溶液，用于麻醉斑马鱼幼鱼，4℃储存；

辅助试剂D：PBST溶液，现配现用；