[发明专利]一种基于RPA-CRISPR-Cas12a可视化检测鸭疫里氏杆菌的试剂盒及应用在审
| 申请号： | 202210744634.2 | 申请日： | 2022-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN115094122A | 公开（公告）日： | 2022-09-23 |
| 发明（设计）人： | 熊文广;谢龙飞;李燕红;郝杰 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/6804;C12Q1/689;C12N15/113;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 段卉 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 rpa crispr cas12a 可视化 检测 里氏 杆菌 试剂盒 应用 | ||
1.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括特异性crRNA、特异性RPA引物对和探针；所述特异性crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述特异性RPA引物对的上游引物RPA-F的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，下游引物RPA-R的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，探针5’端标记荧光基团。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述探针的3’端标记淬灭基团。
5.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述荧光基团为异硫氰酸荧光素或6-羧基荧光素。
6.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述淬灭基团为生物素。
7.权利要求1～6任一所述的组合物在制备鸭疫里氏杆菌检测试剂盒中的应用。
8.一种基于RPA-CRISPR-Cas12a可视化检测鸭疫里氏杆菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1～6任一所述的组合物。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含Cas12/13专用核酸检测试纸条，所述Cas12/13专用核酸检测试纸条包括检测线T线和质控线C线。
10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述T线上包被有双抗，所述C线上包被链霉亲和素。
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