[发明专利]一种黄曲霉毒素菌株及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 202210743091.2 | 申请日： | 2022-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN115058444B | 公开（公告）日： | 2023-04-28 |
| 发明（设计）人： | 曾斌;吕功波 | 申请（专利权）人： | 深圳技术大学 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N15/66;C12N15/31;C12N1/15;C12P17/18;C12R1/69 |
| 代理公司： | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) 44268 | 代理人： | 徐凯凯 |
| 地址： | 518118 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 黄曲霉 毒素 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种黄曲霉毒素菌株的构建方法，其特征在于，包括步骤：
采用原生质体转化法将敲除载体pAoG转化至米曲霉菌株A. oryzae 2351中，构建营养缺陷型菌株；
以含黄曲霉毒素合成调控基因RafA的质粒为模板，设计对应RafA引物并克隆基因RafA，所述基因RafA的核苷酸序列为SEQ ID NO.1，所述RafA引物的核苷酸序列为SEQ IDNO.2-3；
将所述基因RafA与表达载体pEX1通过酶切和酶连处理，构建RafA基因异源表达载体pEX1-RafA；
以含黄曲霉毒素合成调控基因StuA的质粒为模板，设计对应StuA引物并克隆基因StuA，所述基因StuA的核苷酸序列为SEQ ID NO.4，所述StuA引物的核苷酸序列为SEQ IDNO.5-6；
将所述基因StuA与表达载体pEX2B通过酶切和酶连处理，构建StuA基因异源表达载体pEX2B-StuA；
采用原生质体转化法将所述RafA基因异源表达载体 pEX1-RafA或StuA基因异源表达载体pEX2B-StuA转化至所述营养缺陷型菌株中，构建制得黄曲霉毒素菌株。
2.一种黄曲霉毒素菌株，其特征在于，采用权利要求1所述黄曲霉毒素菌株的构建方法制得。
3.一种黄曲霉毒素菌株的应用，其特征在于，将权利要求1构建方法制得的黄曲霉毒素菌株用于生产黄曲霉毒素。
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