[发明专利]一种生物传感器的制备方法及应用在审
| 申请号: | 202210652840.0 | 申请日: | 2022-06-10 |
| 公开(公告)号: | CN114990198A | 公开(公告)日: | 2022-09-02 |
| 发明(设计)人: | 郑岳;邸娅;高立明;杨自凯;郑继尧;于佳翰 | 申请(专利权)人: | 秦皇岛市第一医院 |
| 主分类号: | C12Q1/6825 | 分类号: | C12Q1/6825;G01N21/17;G01N21/31;G01N21/78 |
| 代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 刘婷;朱伟军 |
| 地址: | 066000 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 生物 传感器 制备 方法 应用 | ||
1.一种生物传感器的制备方法,其特征在于:所述方法包括制备DNA-丙烯酰胺共聚物,向所述DNA-丙烯酰胺共聚物中依次加入辣根过氧化物酶和DNA交联链L1形成水凝胶,将释放链R1加入到所述水凝胶中孵育后进行洗脱得到上清液,向所述上清液中依次加入H2O2溶液和3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液得到生物传感器。
2.如权利要求1所述的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述制备DNA-丙烯酰胺共聚物包括在离心管加入带有甲基丙烯酸基团的DNA储备液,在氮气保护下加入引发剂和加速剂,聚合后形成DNA-丙烯酰胺共聚物。
3.如权利要求2所述的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述引发剂为过硫酸铵水溶液,所述加速剂为四甲基乙二胺水溶液。
4.如权利要求2所述的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述DNA储备液中的DNA链与所述DNA交联链L1部分碱基互补。
5.如权利要求3所述的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述DNA储备液的物质的量:硫酸铵水溶液的物质的量:四甲基乙二胺水溶液的物质的量为1:1:1。
6.如权利要求1所述的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液包括HAc-NaAc缓冲溶液,所述H2O2溶液浓度为0.4mM,所述辣根过氧化物酶浓度为4μg/mL。
7.如权利要求1~6中任一项所述的生物传感器的制备方法,其特征在于:所述生物传感器包括蓝色3,3',5,5'-四甲基联苯胺的单电子氧化产物。
8.一种对权利要求7制备的生物传感器的应用,其特征在于:将所述生物传感器应用于DNA的定量检测。
9.如权利要求8所述的生物传感器的应用,其特征在于:检测不同浓度蓝色3,3',5,5'-四甲基联苯胺的单电子氧化产物溶液的吸收,并记录所述蓝色3,3',5,5'-四甲基联苯胺的单电子氧化产物溶液在650nm处的吸收光谱强度,计算DNA溶液与吸收光谱强度的对应关系,对DNA进行量化检测。
10.如权利要求8所述的生物传感器的应用,其特征在于:用808nm激光器辐照所述不同浓度的蓝色3,3',5,5'-四甲基联苯胺的单电子氧化产物溶液90s,同时采用温度计实时监测体系温度变化,计算DNA溶液与温度的对应关系,对DNA进行量化检测。
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