[发明专利]一种小米抗氧化活性肽的制备方法在审
| 申请号: | 202210650995.0 | 申请日: | 2022-06-10 |
| 公开(公告)号: | CN114921517A | 公开(公告)日: | 2022-08-19 |
| 发明(设计)人: | 王俊平;贾木春;王子骁 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/14 |
| 代理公司: | 天津合正知识产权代理有限公司 12229 | 代理人: | 张艳梅 |
| 地址: | 300457 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 小米 氧化 活性 制备 方法 | ||
1.一种小米抗氧化活性肽的制备方法,包含以下步骤:小米蛋白的提取纯化,小米蛋白的酶解和多肽分离,其特征在于,
小米蛋白的提取纯化方法包括以下步骤:
称取一定量小米,用组织捣碎机粉碎,过80目筛,按料液比1:3-5加入正己烷,混合后在室温下充分搅拌2-4h,然后静置1-3h,重复2-3次后倾去上清液,将沉淀物在通风橱风干后得脱脂小米粉;在小米粉中按1:10-15加入蒸馏水,然后用1mol/L的NaOH溶液调pH至8-10,再用超声处理30-50min,磁力搅拌1-2h,接着5000-8000r/min离心10-15min,取上清液以1mol/L的盐酸调pH至3-4,然后收集沉淀,透析除盐,最后冷冻干燥得到小米蛋白粉;
小米蛋白的酶解和多肽分离包括以下步骤:
首先将小米蛋白粉溶解为4-6%(w/v)的溶液,然后将pH值调为9-10,然后在沸水浴中加热15-30min,再降温至55-65℃,加入5000-8000u/g底物的Alcalase 3.0T碱性蛋白酶,反应1-2h,然后再迅速升温至100℃灭酶10-15min,然后再降温至40-50℃,将pH值调为7.5-8.5,中性蛋白酶的添加量为2000-3000u/g底物,反应2-4h后迅速升温至100℃将酶灭活10-15min,5000-7000r/min,离心时间为15-25min离心后取上清液,再冷冻干燥得一种小米抗氧化活性肽。
2.根据权利要求1所述的一种小米抗氧化活性肽的制备方法,其特征在于:每次冷冻干燥之前需要在-80-60℃下预冻18-24h,然后再冻干24-30h。
3.根据权利要求1或2任一权利要求所述的一种小米抗氧化活性肽的制备方法制得的小米活肽肽段0.5-1KD。
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