[发明专利]一种肝细胞癌筛选检测方法及其应用

权利要求书

1.一种肝细胞癌筛选检测方法，其特征在于，所述方法是以特征基因TP53I3为肝细胞癌标志物，通过检测肝细胞癌组织样本中所述特征基因TP53I3的表达量实现筛选检测肝细胞癌。

2.根据权利要求1所述的一种肝细胞癌筛选检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1、选取肝细胞癌样品，所述样品包括组织、细胞和血液；

S2、提取总RNA；

S3、总RNA反转录合成cDNA；

S4、加入特征基因TP53I3的特异性引物，以反转录的cDNA为模板进行荧光定量PCR扩增；

S5、荧光定量PCR检测肝细胞癌组织样本中TP53I3的表达量，起始点表示产物聚集的对数期开始，该期产物的荧光信号呈指数增长，检测仪将此点定义为Ct值；

S6、根据目的基因与内参基因Ct值之差ΔCt可以预测靶基因产物起始浓度，实现对肝细胞癌的筛选检测。

3.根据权利要求2所述的一种肝细胞癌筛选检测方法，其特征在于，S4所述特异性引物为：TP53I3-F:5’-AAGCGAGGAAGTCTGATCAC和TP53I3-R:5’-TTCGGTCACTGGGTAGATTC。

4.根据权利要求2所述的一种肝细胞癌筛选检测方法，其特征在于，S6所述内参基因为GAPDH，S6所述预测靶基因产物起始浓度的方法为：在PCR反应条件相同的情况下，ΔCt值越低，靶基因的起始浓度越大。

5.一种肝细胞癌筛选检测与预后评估试剂盒，其特征在于，所述试剂盒采用权利要求1-4任一项所述方法进行肝细胞癌筛选和检测。

6.根据权利要求5所述的一种肝细胞癌筛选检测与预后评估试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为荧光定量PCR检测试剂盒，所述试剂盒包括特征基因TP53I3的特异性引物、PCR反应液和荧光染料，所述试剂盒用于肝细胞癌筛选检测及预后评估。

7.根据权利要求6所述的一种肝细胞癌筛选检测与预后评估试剂盒，其特征在于，所述特异性引物为：

TP53I3-F:5’-AAGCGAGGAAGTCTGATCAC和TP53I3-R:5’-TTCGGTCACTGGGTAGATTC。

8.根据权利要求6所述的一种肝细胞癌筛选检测与预后评估试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液为荧光定量PCR反应液，所述荧光定量PCR反应液包括dNTP、Mg²⁺、Taq酶及PCR缓冲液，所述Taq酶为热启动酶。

9.根据权利要求6所述的一种肝细胞癌筛选检测与预后评估试剂盒，其特征在于，所述荧光染料为SYBR GreenⅡ。

10.根据权利要求6所述的一种肝细胞癌筛选检测与预后评估试剂盒，其特征在于，所述特异性引物适用于SYBR Green、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、复合探针的检测。