[发明专利]石佛翠茶多糖及其提取方法和应用

权利要求书

1.一种石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将石佛翠茶叶进行烘干和粉碎过筛，得到茶粉，将茶粉用石油醚浸泡搅拌、抽滤，使茶粉脱脂，将脱脂后的茶粉用无水乙醇浸泡搅拌、抽滤，使茶粉脱色，经干燥后，得到预处理的茶粉；

(2)将预处理的茶粉和复合酶加入磷酸缓冲液中，所述复合酶为纤维素酶和离析酶，所述纤维素酶与离析酶的酶活比为1∶1～2，在45℃～55℃下进行酶解反应2h～3h，得到酶解产物；

(3)将酶解产物进行钝化、离心，所得第一上清液回调pH值至6.9～7.2待用，所得沉淀加入水中升温至70℃～80℃，反应1h～3h，得到水提产物；

(4)将水提产物进行离心，所得第二上清液回调pH值至6.9～7.2，然后与所述第一上清液混合，进行蒸发浓缩，加入无水乙醇，于4℃～6℃下静置12h～16h，然后再次离心，将所得沉淀烘干，加三氯乙酸溶液除蛋白，pH控制在3.5～4.2；

(4)将上述除蛋白产物置于4℃～6℃静置2h～3h，经离心后，得第三上清液并回调pH值至6.9～7.2，然后进行透析、蒸发浓缩和冷冻干燥，得到石佛翠茶多糖。

2.根据权利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步骤(2)中，所述预处理的茶粉与磷酸缓冲液的质量体积比为1g∶30mL～40mL，所述复合酶占磷酸缓冲液的质量分数为0.004wt％～0.006wt％，所述磷酸缓冲液的pH值为4.5～5。

3.根据权利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步骤(4)中，蒸发浓缩直至浓缩液体积为步骤(2)所用磷酸缓冲液体积与步骤(3)所用水的体积总和的1/10；所述除蛋白需确保最终反应体系的总体积为步骤(2)所用磷酸缓冲液体积的1/3～1/4。

4.根据权利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步骤(3)中，所述钝化的时间为30min～50min，所述离心的转速为4000r·min^-1～4500r·min^-1，所述离心的时间为10min～12min，所述水提时间为1h～2h，所述水的加入量按预处理的茶粉与水的质量体积比为1g∶10mL～20mL计。

5.根据权利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步骤(4)中，所述离心的转速为4000r·min^-1～4500r·min^-1，所述离心的时间为10min～12min，蒸发浓缩液与无水乙醇的体积比为1∶3～4，所述再次离心的转速为4000r·min^-1～4500r·min^-1，所述离心的时间为10min～12min，所述三氯乙酸溶液中三氯乙酸的质量分数为3％～5％。

6.根据权利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步骤(4)中，所述离心的转速为4000r·min^-1～4500r·min^-1，所述离心的时间为10min～12min，所述透析是指将pH值回调后的第三上清液装入分子截留量为8000Da～13000Da的透析袋中进行透析，每4h～6h更换一次水，共透析24h～48h，所述真空冷冻干燥的压强为10Pa～15Pa，温度为-40℃～-35℃，所述冷冻干燥的时间为36h～48h。

7.根据权利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步骤(1)中，所述烘干的温度为60℃～75℃，所述烘干的时间为4h～5h，间隔1h～1.5h翻面一次，所述茶粉体积与石油醚体积之比为1∶10～15；

所述脱脂过程中，所述浸泡搅拌的时间为8h～12h，重复所述浸泡搅拌、抽滤过程2次～4次；

所述脱色过程中，所述浸泡搅拌的时间为6h～8h，重复所述浸泡搅拌、抽滤过程2次～4次，直至茶粉无色；

和/或，步骤(1)中，所述石佛翠茶叶为石佛翠夏秋茶叶。

8.一种如权利要求1～7中任一项所述的石佛翠茶多糖的提取方法提取得到的石佛翠茶多糖。