[发明专利]反式-1,2-二氨甲基环丁烷与其顺式异构体的分离检测方法

说明书

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及反式‑1,2‑二氨甲基环丁烷与其顺式异构体的分离检测方法。本发明提供了反式‑1,2‑二氨甲基环丁烷或其盐中所含顺式异构体或顺式异构体盐的检测方法：将待测样品与具有紫外吸收的衍生化试剂进行衍生化反应，然后采用HPLC对顺式异构体或其盐进行定性和/或定量检测，色谱柱填充剂为表面涂敷直链淀粉‑三(3,5‑二甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶，流动相溶剂为正己烷与异丙醇的混合溶剂，其中正己烷：异丙醇体积比为(88：12)～(92：8)。采用本发明提供的检测方法能够实现洛铂起始物料反式‑1,2‑二氨甲基环丁烷中所含顺式异构体的定性和定量检测。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及反式-1,2-二氨甲基环丁烷与其顺式异构体的分离检测方法。

背景技术

洛铂是由德国爱斯达制药有限公司(ASTA Medica AG)原研的第三代铂类抗肿瘤药物，属于烷化剂类的抗肿瘤药物，常应用于慢性粒细胞白血病、晚期乳腺癌、小细胞肺癌。洛铂化学名为1,2-二氨甲基-环丁烷-乳酸合铂，其化学结构如下所示：

根据药品标准，洛铂是以下两种非对映异构体的混合物：

反式-1,2-二氨甲基环丁烷是合成洛铂的关键起始物料，但其中往往同时存在顺式异构体，且顺式异构体通过合成路线会逐步传递到终产品洛铂原料药中，并生成非药效成分的类洛铂，比如结构如下所示的洛铂异构体杂质C，影响产品质量。

因此，在起始物料反式-1,2-二氨甲基环丁烷中分离检测其顺式异构体是很有必要的，对产品质量控制有重要意义。

迄今为止，尚未有反式-1,2-二氨甲基环丁烷与其顺式异构体分离检测方法的相关文献报道，目前急需开发一种快速、准确的检测方法。

发明内容

为了填补现有技术的空白，本发明提供反式-1,2-二氨甲基环丁烷与其顺式异构体的分离检测方法。

本发明提供了反式-1,2-二氨甲基环丁烷或其盐中所含顺式异构体或顺式异构体盐的检测方法，将待测样品与具有紫外吸收的衍生化试剂进行衍生化反应，然后采用HPLC对顺式异构体或其盐进行定性和/或定量检测，色谱柱填充剂为表面涂敷直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶，流动相溶剂为正己烷与异丙醇的混合溶剂，其中正己烷：异丙醇体积比为(88：12)～(92：8)。

其中，衍生化试剂的主要作用是将没有/弱紫外吸收的化合物转化为有/较强紫外吸收的化合物，便于用带有紫外检测器的液相色谱仪进行检测。

进一步地，所述的色谱柱选自CHIRALPAK AD-3、CHIRALPAK AD-H、CHIRALPAK AD中至少一种或其等效色谱柱。其中，CHIRALPAK AD-3、CHIRALPAK AD-H、CHIRALPAK AD为目前较为常见的、以表面涂敷直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填充剂的色谱柱。

优选地，所述的色谱柱为CHIRALPAK AD-H或其等效色谱柱。

进一步地，所述色谱柱CHIRALPAK AD-H的内径为2.1～20mm，长度为10～250mm，填料粒径为5μm。目前可商业化应用的CHIRALPAK AD-H色谱柱内径多在2.1～20mm范围内，长度多在10～250mm范围内，填料粒径多为5μm。

优选地，所述色谱柱CHIRALPAK AD-H的内径为4.6mm。

优选地，所述色谱柱CHIRALPAK AD-H的长度为100～250mm。对于CHIRALPAK AD-H色谱柱，目前可商业化应用的分析柱长度多在100～250mm范围内。